【摘 要】
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目的本实验研究组织因子（Tissue factor,TF）是否参与介导乳腺癌细胞和人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）粘附,并进行了相关机制的初步探讨,以期为肿瘤转移的靶向性治疗提供新的思路。方法1.Western-Blotting方法检测三种乳腺癌细胞系（MDA-MB-231,HS-578T,MCF-7）、人脐静脉内皮细胞TF
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目的本实验研究组织因子（Tissue factor,TF）是否参与介导乳腺癌细胞和人脐静脉内皮细胞（Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）粘附,并进行了相关机制的初步探讨,以期为肿瘤转移的靶向性治疗提供新的思路。方法1.Western-Blotting方法检测三种乳腺癌细胞系（MDA-MB-231,HS-578T,MCF-7）、人脐静脉内皮细胞TF表达水平;MDA-MB-231、HS-578T细胞中β1整合素表达水平;不同浓度TF重组蛋白处理HS-578T细胞后CD44、ICAM-1表达水平。2.流式细胞方法检测三种乳腺癌细胞系（MDA-MB-231,HS-578T,MCF-7）TF表达水平。3.免疫组化检测MDA-MB-231细胞TF表达水平及部位。4.静态粘附和平行板流动小室粘附实验检测乳腺癌细胞和HUVEC粘附;内皮细胞粘附实验检测内皮细胞与TF重组蛋白粘附。5.MTT法检测TF抗体、β1整合素抗体和重组蛋白TF对细胞活性的影响。结果1.乳腺癌MDA-MB-231细胞中TF表达明显较HS-578T和MCF-7细胞高（P<0.05）。2.高表达TF的MDA-MB-231细胞与HUVEC粘附高于HS-578T和MCF-7细胞（P<0.05）,TF抗体封闭MDA-MB-231细胞后其与HUVEC粘附下降（P<0.05）。3.外源性TF处理低表达组织因子的HS-578T细胞后其与HUVEC粘附增加（P<0.05）。4.人脐静脉内皮细胞低表达TF高表达β1整合素,HUVEC与TF重组蛋白粘附明显高于对照组,β1整合素抗体封闭HUVEC后其与TF重组蛋白粘附下降（P<0.05）。使用用TF抗体封闭MDA-MB-231细胞,β1整合素抗体封闭HUVEC,TF抗体封闭MDA-MB-231细胞联合β1整合素抗体封闭HUVEC后,与对照组比较,MDA-MB-231细胞与HUVEC粘附明显下降（P<0.05）。5.MDA-MB-231细胞CD44表达高于HS-578T细胞（P<0.05）,外源性TF处理乳腺癌HS-578T细胞后CD44表达增加（P<0.05）。结论1.高表达TF的乳腺癌MDA-MB-231细胞与HUVEC的粘附增加,外源性TF处理低表达组织因子的HS-578T细胞后其与HUVEC粘附增加,提示TF参与介导了乳腺癌细胞与HUVEC粘附。2.TF可能通过与HUVEC表面的β1整合素相互作用介导了MDA-MB-231细胞与HUVEC粘附。3.MDA-MB-231细胞CD44粘附分子表达高于HS-578T细胞,外源性TF处理HS-578T细胞后CD44表达增高,与MDA-MB-231细胞的高粘附以及外源性TF促进HS-578T细胞粘附能力相一致,提示TF也可能通过上调CD44介导乳腺癌细胞与HUVEC粘附。
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