蚂蟥Whitmaniapigra Whitman,属于水蛭科动物,是《中国药典》（2015版）药材水蛭的基原动物之一,以干燥全体入药,具有破血通经,逐瘀消癥的功效。近年来,随着以水蛭为主要成分的中成药及保键产品的研发,水蛭的养殖供不应求。蚂蟥属于雌雄同体动物,雄性腺先发育,越冬结束时精卵细胞同步成熟。环境温度在极大程度上影响水生动物的生长和繁殖,因此,本文拟选择越冬期和非越冬期,观察温度对蚂蟥生长及性腺发育的影响,为蚂蟥的养殖管理和性腺发育机理的研究提供依据。（1）将越冬期蚂蟥置于21℃的光照培养箱,以自然越冬蚂蟥为对照,越冬结束后测定蚂蟥的体重、性腺重及内在品质,石蜡切片观察蚂蟥精卵巢组织形态。结果表明,与自然越冬组相比,恒温越冬蚂蟥体重是其2.35倍,雌雄性腺重量分别增加11.54%、48.33%,卵巢囊泡内卵黄期细胞和胶膜形成期细胞以及精巢囊腔内精原细胞和初级精母细胞均显著增加,抗凝血酶活性增加27.85%。综上,恒温能促进越冬蚂蟥生长、精卵细胞发育,提高抗凝血酶活性。（2）将非越冬期蚂蟥分别置于4℃、12℃、20℃、28℃的温度下养殖,50d后测定其体重、性腺重,石蜡切片观察蚂蟥精卵巢组织形态。结果表明,蚂蟥的体重、体重变化率、特定生长率随温度升高均呈先升高后降低趋势,20℃最高。随温度升高,蚂蟥的雌性腺指数和雌性腺重呈先增大后减小的趋势,20℃最高;蚂蟥的雄性腺指数和雄性腺重基本呈增大趋势,28℃最高。蚂蟥卵巢囊泡内卵黄期细胞和胶膜形成期细胞均随温度升高呈先增多后减少的趋势,20℃最多;蚂蟥精巢外壁在4℃和12℃皱缩,精巢囊腔内细胞数较少;20℃和28℃精巢饱满,其中20℃精巢囊腔内初级精母细胞显著多于其他组别,28℃次级精母细胞显著多于其他组别。综上,20℃是蚂蟥生长和雌性腺发育较适宜的温度,28℃是雄性腺发育较适合的温度。（3）该研究对蚂蟥性腺热休克蛋白90基因（WpHSP90）和热休克蛋白83基因（WpHSP83）进行了克隆、生物信息学分析和原核表达。结果表明,蚂蟥WpHSP90和WpHSP90基因完整的开放阅读框分别编码790和722个氨基酸,编码蛋白的等电点分别为4.92和4.99,不稳定系数均小于40,亲水系数均为负值,均属于稳定的亲水性蛋白,且编码的蛋白均无信号肽,无跨膜结构域,属于非分泌蛋白。WpHSP90和WpHSP83与其它物种的氨基酸序列的相似性不高,WpHSP90最高为68.71%,WpHSP83则为83.82%。SDS-PAGE结果显示,在E.coli BL21中成功诱导表达了WpHSP90和WpHSP83蛋白,与预期蛋白分子量大小一致。（4）对不同温度条件下蚂蟥的WpHSP90、WpHSP83和AKT基因在雌性腺和雄性腺中的表达特性进行了研究。结果表明,随温度升高,雌雄性腺中WpHSP90基因的表达量呈先减小后增大趋势,28℃显著增高,WpHSP83的表达量在4℃至20℃的条件下差异不显著,28℃时亦显著增高,且雌性腺的表达量明显高于雄性腺,AKT的表达量则随温度升高呈增大趋势。综上,WpHSP90对于维持性腺内环境的稳定有重要的作用,WpHSP83在应激达到一定程度时也参与维持性腺内环境的稳定,除此之外,WpHSP83可协同AKT调控蚂蟥雌雄性腺的发育。