吉林省烟草野火病菌生理分化研究

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烟草野火病(Pseudomonas syringae pv.tabaci)是世界普遍发生的一种主要侵染烟草的细菌病害。本文首次利用RAPD技术与生理生化性状、药剂敏感性的测定相结合的方法对吉林省烟草野火病菌的生理分化情况进行了初步研究,从遗传物质DNA水平证实病原菌的生理分化。主要研究结果如下:1对吉林省不同地区的30个供试菌株进行荧光反应、氧化酶反应、精氨酸双水解反应、果聚糖产生、马铃薯软腐、硝酸盐反应、明胶水解和碳源的利用等生理生化反应。实验结果表明供试菌株在生理生化性状上差异不显著,只有在果聚糖反应上存在差异。2采用含毒介质法测定供试菌株对农用链霉素和新植霉素的敏感性。结果表明,敦化黄泥河镇的菌株与其它地区菌株相比对农用链霉素的敏感性差异显著;所有供试菌株对新植霉素的敏感性不存在差异。农用链霉素和新植霉素抑菌的最低有效浓度较低,抑菌效果较好,是防治烟草野火病的首选药剂3从86个RAPD随即引物中筛选出11个引物对供试菌株的基因组DNA进行分析,共扩125条带,其中103条带具有多态性,多态性带的比率达82.4%。通过聚类分析将供试菌株划分为7个类群(相似系数0.62):A类群包括敦化市黄泥河镇的所有供试菌株:B类群包括榆树黑林镇的全部菌株和榆树谢家的两个菌株:C类群包括和龙一个菌株:D类群包括安图和大安各一个菌株;E类群包括榆树谢家和大安各一个菌株,柳河四个菌株,德惠吉旦沟镇、德惠天台镇和德惠长新镇的全部供试菌株。F类群包括柳河一个菌株;G类群包括和龙的一个菌株。在更高的水平上类群B和类群E还可以进一步划分为众多的亚群。从聚类分析结果可以看出,来源相同地区的多数菌株聚为一类,表明聚类组的划分与菌株的地理来源有一定的相关性。从相似系数来看,供试菌株间相似系数在0.2703-0.8431,表现出丰富的遗传多样性,烟草野火病菌存在生理分化现象。4菌株RAPD分析和生理生化以及药剂敏感性的测定结果表明:柳河、榆树谢家、德惠吉旦沟镇和敦化黄泥河镇的烟草野火病菌出现生理分化现象。RAPD技术可用于烟草野火病菌生理分化分析。5通过研究烟草野火病菌RAPD分析过程中的影响因素,建立了适合烟草野火病菌RAPD分析的比较稳定的PCR反应体系。
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