研究背景系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）以自身抗体产生、异常免疫应答为特征,是一种累及多系统的自身免疫性疾病。疾病发病隐匿,病情迁延不断,预后不佳。然而,SLE发病机制十分复杂,至今尚未阐明。近年来,表观遗传修饰为SLE发病机制研究提供新思路,其中N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m6A）修饰及长链非编码RNA（long noncoding RNA,lnc RNA）已被证实可通过影响免疫细胞生物学功能参与SLE疾病进展。同时,m6A修饰可通过多种机制参与lnc RNA的基因调控,进而影响血管炎症、腹主动脉瘤以及结直肠癌等疾病。但是,m6A修饰相关lnc RNA对于SLE的影响十分有限,有待进一步研究。目的根据甲基化RNA免疫共沉淀高通量测序（Methylated RNA Immunoprecipitation sequencing,Me RIP-seq）数据筛选m6A修饰相关lnc RNA,比较患者及对照中T淋巴细胞中lnc RNAs表达水平,并验证lnc RNAs对T淋巴细胞功能的影响。方法本实验采取病例对照设计,根据已建立Me RIP-seq数据筛选在SLE中m6A修饰水平存在差异的lnc RNAs,后续实验可分为两部分:（1）T淋巴细胞中m6A修饰相关lnc RNAs表达水平检测借助实时定量聚合酶链式反应（real-time quantitative polymerase chain reaction,RTq-PCR）技术,在70例SLE患者和82例对照的T淋巴细胞中对m6A修饰相关lnc RNAs的差异表达进行验证,并分析lnc RNAs表达水平与SLE患者临床表现、疾病活动情况、抗体指标及用药情况间关联。最终,选定LINC00342进行细胞功能学验证。（2）体外细胞实验验证LINC00342对T淋巴细胞功能的影响选用pcSLenti-p A-LINC00342-CMV-SFH-EGFP-P2A-Puro-WPRE病毒,构建LINC00342过表达Jurkat细胞系。利用细胞计数试剂盒-8（Cell Counting Kit-8,CCK-8）试剂对LINC00342基因过表达组、阴性对照组的细胞增殖进行定量,研究LINC00342基因对Jurkat细胞增殖能力的影响;利用荧光素别藻蓝蛋白（Allophycocyanin,APC）标记后的膜联蛋白V（Annexin V）和7-氨基放线菌素D（7-amino-actinomycin D,7-AAD）匹配使用,借助流式细胞仪检测LINC00342基因过表达组与阴性对照组细胞凋亡情况。结果通过分析Me RIP-seq数据,本研究初步筛选出7个在SLE疾病中m6A修饰水平存在差异的lnc RNAs,分别为LINC01578、C1orf132、XIST、PSMB8-AS1、SNH68、LINC00342和EBLN3P。T淋巴细胞验证发现,LINC01578、C1orf132、XIST、PSMB8-AS1、SNH68、LINC00342和EBLN3P的表达水平在SLE患者中均下调（均有P＜0.05）。对患者临床信息进行分组后发现:LINC00342在系统性红斑狼疮疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index,SLEDAI）＞4、红细胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate,ESR）异常及出现血尿的患者中表达下调（均有P＜0.05）;XIST在SLEDAI＞4（Z=-2.316,P=0.021）及ESR异常（Z=-3.349,P=0.001）组中表达水平降低;LINC01578、C1orf132、PSMB8-AS1及SNH68在ESR异常升高的患者中下调（均有P＜0.05）;EBLN3P在血小板（blood platelet,PLT）减少的患者中表达水平降低（Z=-2.095,P=0.036）;EBLN3P在服用激素的患者中表达上调（Z=-2.223,P=0.026）。细胞实验结果显示,与阴性对照组相比,LINC00342过表达组细胞凋亡比例降低（t=-9.520,P=0.001）,细胞增殖能力在两组间无差异。结论本研究发现,SLE患者LINC01578、C1orf132、XIST、PSMB8-AS1、SNH68、LINC00342和EBLN3P的m6A修饰水平存在差异。T淋巴细胞验证实验中7种lnc RNAs表达均下调,其中LINC00342在SLEDAI＞4、ESR异常及出现血尿的患者中表达下调。过表达LINC00342后Jurkat细胞凋亡比例降低。研究初步揭示m6A修饰lnc RNAs可能参与SLE疾病进展,LINC00342可能通过调控T淋巴细胞凋亡进而参与SLE疾病进展,具体机制有待进一步研究。