基于衰老海马神经干细胞增殖与分化相关基因Nestin、Ki-67蛋白表达变化的补肾方作用机理研究

来源 :河南中医学院 河南中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanglyyou66
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目的:观察大鼠自然衰老时血中皮质酮(CORT)含量与海马神经干细胞分裂和增殖的变化及补肾方的作用,探索衰老的机制及补肾方的作用机理。  方法:以自然衰老 SD雄性大鼠(24月龄)为模型。雄性 Sprauge-Dawley(SD)大鼠100只,随机分为3组,老年组(24月龄)30只,左归丸组(24月龄)35只,右归丸组(24月龄)35只;另设青年组(5月龄)30只。将药物打粉混入饲料中食用,左、右归丸组老年大鼠从20月龄开始,按左、右归丸0.75g/100g/d(相当于成人临床用量的15倍)自由饲用,每周停药两天,连续4个月。青年组、老年组普通饮食、饮水。指标观测:电镜下观察海马神经细胞超微结构;Western-Blot法检测大鼠海马组织 Nestin和Ki-67的蛋白表达;ELISA法检测大鼠血清 CORT含量。  结果:1、与青年组相比,老年组大鼠脑神经细胞的线粒体和线粒体嵴明显减少,神经突触小泡和线粒体明显减少。与老年组相比,左归丸组脑神经细胞超微结构中的线粒体明显增加,神经突触小泡明显增大而数量明显增加,突触内的线粒体明显增加;右归丸组脑神经细胞超微结构中的线粒体有所增加,神经突触小泡明显增大而数量没有明显增加,突触内的线粒体明显增加。2、与青年组相比,老年组大鼠海马 Nestin和Ki-67蛋白表达明显降低(P<0.05);与老年组相比,左、右归丸组大鼠海马 Nestin和Ki-67的蛋白表达显著升高(P<0.05)。3、与青年组相比,老年组大鼠血清 CORT的含量升高较为显著(P<0.05);与老年组相比,左、右归丸组大鼠血清 CORT含量明显降低(P<0.05)。  结论:1、老年大鼠血清 C O RT含量增高,左归丸和右归丸均有降低老年大鼠血清 CORT含量的作用;2、老年大鼠海马组织 Nestin和Ki-67蛋白的表达下调,左归丸和右归丸均能上调海马组织 Nestin和Ki-67蛋白的表达;3、老年大鼠海马神经细胞出现能量(ATP)代谢的结构改变,左归丸和右归丸均能改善这一细胞超微结构的变化;4、大鼠血清中增高的C O RT可能会通过反馈作用影响海马 NSCs分裂和增殖能力的下降导致衰老,左归丸和右归丸可通过调节这一反馈作用而延缓衰老;5、血中增高的C O RT含量影响海马 NSCs的分裂和增殖能力下降可能是中医肾虚衰老的现代医学机理之一。
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