番木瓜性别差异分化和CpSVP基因分析

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番木瓜是一种常见的热带水果,番木瓜树是具有三种性别分化的被子植物。由于性染色是新生起源的染色体,所以也是研究性染色体进化的模式植物。番木瓜的性别决定是XY性染色体系统:XX染色体型植株为雌株,XY染色体型植株是雄株,XYh染色体型植株是两性植株。番木瓜X染色体和Y染色体(或Yh染色体)序列相似度为85%左右,而Y和Yh染色体相似度为99.6%。番木瓜SVP基因在X染色体上缺失,CpSVPY基因和CpSVPYh基因结构不同,是唯一验证筛选到的Y和Yh染色体上表达差异的基因。前期的研究推测番木瓜性染色体(Y/Yh染色体)特异的CpSVP基因是导致番木瓜不同性别植株之间表型差异分化的候选功能基因之一。本研究主要分为两个部分:番木瓜三种性别差异分化的观察总结和番木瓜CpSVP基因分析以及转化试验。目的是探索番木瓜性别差异分化和CpSVP基因之间的关系。得到的主要研究结果如下:1.根据花发育过程中标志性结构的变化将番木瓜雄花的发育过程划分为十个时期,雌花的发育过程划分为六个时期,两性花的发育过程划分为十个时期,为番木瓜性别分化的分子机制研究提供形态学依据。2.验证了番木瓜CpSVP基因有两个拷贝、三种表达形式:常染色体上的CpSVP基因(CpSVPA基因)、性染色体上的一对等位基因即Y染色体上的CpSVP基因(CpSVPY基因)和Yh染色体上的SVP基因(CpSVPYh基因)。通过对番木瓜CpSVP基因的结构进行比较发现,CpSVPYh基因相比CpSVPY基因缺失了一个MADS结构域,CpSVPA基因和CpSVPY基因的序列相似度为94%,可能会有功能冗余。番木瓜的CpSVP基因在番木瓜各个组织中的表达情况分析得出:番木瓜CpSVPY基因在不同大小花中持续地高表达,在叶片中低表达;而CpSVPYh基因在花中低表达,在叶片中高表达;两者表达模式相反。CpSVPY基因在雄蕊发育成熟期表达量逐渐升高,尤其在花粉中显著表达。3.在拟南芥中过表达CpSVPY基因,转基因植株中未出现广泛报道的异源基因过表达的变异表型,如抑制开花或花轮结构变异等。同时也开展了农杆菌介导的番木瓜愈伤组织转化方法的探索。表明经过农杆菌处理后愈伤组织的存活率和抗性筛选后愈伤组织的分化效率是番木瓜愈伤组织农杆菌转化试验的关键。番木瓜三种性别植株中,性别差异分化最为显著的两个特征:不同性别花的结构差异和伴雄性长花柄稳定遗传的表型特征。这两个特征都会对实际种植产业的劳动方式带来便利。大量的测序数据已经对番木瓜性染色体特异区的基因进行了多角度的比对分析。因此,针对候选基因进行进一步分析和生物学功能验证是番木瓜性别决定研究中必要的实践内容。
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