通过遗传转化提高浮萍淀粉积累能力

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyf853
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
浮萍(duckweed)作为一种新型的生物质能源植物,具有生长速率快,淀粉含量高,木质素含量低的优势,且不与人争粮争地,是一种在生物能源研究方面的理想实验材料。提高浮萍的淀粉含量是生产生物乙醇的关键,可通过改变浮萍的生长速度和淀粉积累能力来实现。本论文主要通过在浮萍科(Lemnaceae)浮萍属(Lemna)的L.turionifera 5511株系(文中通称浮萍)中过表达浮萍淀粉合成路径中的关键酶ADPG焦磷酸化酶编码基因APL1和结合态淀粉合酶编码基因GBSS基因来提高淀粉的积累能力。利用农杆菌转化法获得了多个独立的GBSS和APL1转基因浮萍株系,并在DNA水平上完成了相关的转基因鉴定。本课题进一步对GBSS转基因株系进行了深入的研究。RNA水平鉴定、GUS染色和GBSS酶活性分析结果均表明转入的GBSS基因得到了稳定表达。表型分析结果显示,转基因株系的叶状体面积比野生型对照的大,生长速率也高于野生型,而且在培养12天后每个培养瓶中转基因株系的鲜重有所增加。测定了培养一天内叶状体中淀粉含量的动态变化,明确了测定淀粉含量的最佳取样时间为光照后12 h,之后分析比较了野生型浮萍和转基因浮萍单位干鲜重淀粉含量和每瓶中的淀粉总量以及直链淀粉含量的差异,实验结果表明转基因株系GBSS-24的淀粉含量、每瓶的淀粉总量和直链淀粉含量都高于对照,其淀粉含量可达62.6mg/g(DW),直链淀粉的含量为39.7 mg/g(DW),显示出该株系比对照更适合用于后期的发酵,可作为大规模生产生物质能的优选株系。利用GBSS-24株系探究了不同培养条件(不同光周期、营养胁迫、提高环境中CO2浓度)对植株淀粉含量的影响,结果表明长日照条件、增加环境中CO2浓度(0.5%)和营养胁迫均有利于总淀粉的积累,而且GBSS-24株系叶状体中淀粉的积累量显著高于对照株系。实验结果暗示,在利用GBSS-24株系进行淀粉生产的过程中可通过调节生长条件来获得更大效益。
其他文献
文拉法辛(VEN)是治疗抑郁症的一线临床药物之一,长期使用可能会引发威胁生命的血清素综合症。另外褪黑素(MT)可以改善抑郁行为。在本论文中,我们利用利血平急性处理斑马鱼20分钟,使其产生抑郁行为,探讨文拉法辛和褪黑素联合治疗斑马鱼7天后的抗抑郁效果。我们通过新型水缸试验测试了成年斑马鱼的抑郁行为,并使用酶联免疫吸附测试(ELISA)评估了斑马鱼大脑中5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)和去甲肾上
目的:通过观察针刺联合雷火灸神阙穴对顽固性面瘫伴焦虑状态患者面神经功能及其焦虑症状的评分变化,探讨针刺联合雷火灸神阙穴对顽固性面瘫患者临床疗效、焦虑情绪的影响,为临床治疗顽固性面瘫伴焦虑状态提供更有效的治疗方案。方法:将符合纳入标准的101例顽固性面瘫伴焦虑状态患者,按随机数字表法,分为观察组和对照组。观察组针刺取穴:患侧阳白、太阳、四白、颧髎、颊车、地仓、翳风、牵正,气海,双侧合谷、足三里;百会
抗体药物是生物医药领域的重要部分,它在各种疾病的治疗中发挥独特的作用。纳米抗体药物更是凭借着自身分子小,穿透力强的性质得到生物医药领域研究的青睐。针对抗体的筛选手段主要依靠靶点抗原与抗体的相互作用,目前主要有酵母双杂交,噬菌体展示等技术,在筛选特异性抗体时发挥重要作用。但是目前的筛选技术获得的抗体往往还需要再进行额外的亲和力成熟,才能获得具有高亲和力的抗体。而亲和力成熟的步骤费时费力,因此我们希望
铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,P.aeruginosa)是临床上常见的革兰氏阴性病原菌,在自然界中分布广泛,主要引起免疫力低下人群的急慢性感染。抗生素是临床上治疗细菌引起的传染病的主要方法,而铜绿假单胞菌具有较强的耐药性,因此其感染难以治愈且容易出现反复性感染。铜绿假单胞菌主要有三种耐药性机制,分别为固有性耐药机制,获得性耐药机制和适应性耐药机制。值得注意的是,当细菌
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种能够产生杀虫晶体蛋白的革兰氏阳性菌。Bt来源的微生物杀虫剂现在已经在世界范围上用于防治农作物害虫,但是在野外条件下由于阳光中的紫外线辐射,Bt杀虫剂会迅速失去生物活性。黑色素能够作为光保护剂来提高Bt抗紫外的能力,因此获得一株可以高产黑色素的Bt菌株用来保护杀虫晶体蛋白具有十分重要的意义。我们实验室前期研究发现在大多数Bt菌
目的:观察“刘氏骨伤”理筋手法治疗单纯性髌股关节炎(patellofemoral osteoarthritis,PFOA)的临床疗效及安全性,初步发掘“刘氏骨伤”理筋手法治疗PFOA的临床价值。方法:将60例PFOA患者分为三组:A组20例,单纯采用股四头肌抗阻训练;B组20例,采用口服洛索洛芬钠联合股四头肌抗阻训练;C组20例,采用“刘氏骨伤”理筋手法联合股四头肌抗阻训练,连续治疗3周。分别观察
语用失误是跨文化交际中不可避免的问题,尤其是英汉语言交际问题,英汉语言结构特点、使用方式、历史背景的不同,在实际跨文化交际的过程中会出现各种语用失误问题。基于此,从英汉两种语言的特点着手,分析了这两种语言的差别以及出现语用失误的原因,并提出了相关对策,以期能帮助交际者提高跨文化交际英汉语言使用的准确性。
青花菜素有“蔬菜皇冠”美誉,是我国常见大宗蔬菜种类之一,营养价值丰富。植物花器官建成及发育的遗传基础及分子调控机制一直是近年来植物学领域研究热点。已有研究表明AP1、CAL在拟南芥蕾球性状形成中发挥关键作用,但AP1、CAL类基因在青花菜中功能尚不明确,青花菜花球特殊蕾球性状形成的分子机制一直未被阐释。基于此,本研究对青花菜中BolAP1 A及BolCAL 2S进行了克隆、表达特征及功能探究。相关
自然资源中以木质纤维素为代表的可再生资源在地球上大量存在,然而木质素的去除是利用纤维素这一资源最关键的一步。木质素的存在限制了纤维素酶对纤维素及半纤维素的可利用性,导致其水解效率和可利用率降低。若进行预处理去除或修饰木质素则可以促进木质纤维素的分解。木质素降解真菌可以相对高效地降解木质素,其反应条件温和、无污染,在生物前处理领域受到了越来越多人的关注。目前,人们普遍认为木质素降解菌之一的白腐真菌利
目的:观察冠心病痰浊证患者用化浊法(化浊方)治疗前后的临床疗效及副反应、单核细胞亚群 CD14++CD16-(Mo1)、CD4++CD16+(Mo2)与 CD4+CD16+(Mo3)及其表面标志物TLR4的表达水平,探讨化浊法(化浊方)治疗冠心病痰浊证的临床效果,探讨化浊法(化浊方)对冠心病痰浊证患者单核细胞亚群及其表面标志物TLR4表达水平的影响,研究化浊法(化浊方)治疗冠心病(痰浊证)可能的免