干扰素-γ对肝星状细胞分泌细胞外基质影响研究

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前言 肝硬化是严重威胁人类生命健康的疾病。各种病因所致的肝硬化的发生发展进程中均伴有明显的肝纤维化,肝内胶原纤维生成增多,分布异常。因此抗肝纤维化的研究成为防治肝硬化、门静脉高压症发病的关键。研究表明,肝纤维化的中心环节是肝星状细胞(Hepatic stellate cell, HSC)在组织炎症坏死区域向肌成纤维细胞(Myofibroblast,MFB)转型的激活过程。HSC体外培养成功为肝纤维化的研究提供了理想的细胞模型。自80年代中期通过基因工程技术成功生产出重组γ-干扰素(IFN-γ),现IFN-γ已广泛用于临床。近年国外的动物与体外实验均报道IFN-γ有较强的抗纤维化作用,是肝纤维化发展中的一个关键调节因子。本研究观察了IFN-γ对于体外培养的HSC分泌细胞外基质(Extracellular matrix, ECM)的影响作用,以期阐述IFN-γ抗肝纤维化的部分作用机制,为临床肝纤维化的药物治疗提供更多的理论依据。 实验材料 细胞系 肝星状细胞株(rHSC-99) 主要试剂 透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)放射免疫分析测定盒,DMEM,胎牛血清,25cm2培养瓶,96孔培养板,注射用人重组IFN-γ,其他常用药品为中心实验室及免疫实验室提供。 主要仪器 倒置显微镜,GC-1200放射免疫γ计数仪,KDC-2046低温大容量离心机,Nu4500E型CO2培养箱,MDF-U0541低温冰箱,MDF-U4086S超低温冰箱,GB11241-89电热恒温水浴箱,ZBY149-83电热恒温鼓风干燥箱。
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