百合鳞茎酚类物质抗氧化及调节脂质代谢作用研究

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百合鳞茎是最早的药食同源食品之一,富含多酚、生物碱、皂甙和多糖等多种生物活性物质。本研究以“卷丹百合”为材料,提取百合鳞茎中酚类物质(Lily bulbs polyphenols,LBP),鉴定LBP中酚类物质组成,并通过模拟体外消化研究酚类物质变化;进而在体内外研究了 LBP的抗氧化作用及降脂作用。研究结果为百合鳞茎酚类物质的应用提供了试验依据。主要研究内容与结果如下:(1)百合鳞茎多酚的提取、组分鉴定以及抗氧化研究。采用超声波辅助甲醇提取,并用乙酸乙酯萃取方法得到LBP。采用福林酚法测定LBP中多酚类物质含量为53.76± 1.12mg/g。通过DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力以及Fe3+还原力评估了LBP具有一定的抗氧化能力;利用HPLC-DAD-MS/MS法鉴定LBP组分,分离并鉴定出13种物质,其中含量最丰富的为1-O-咖啡酸-3-O-p-香豆素甘油酯(1-O-caffeic acid-3-O-p-coumarin glyceride)。(2)百合鳞茎多酚在模拟体外消化中酚类组分的变化。通过模拟体外口腔、胃、肠道消化,通过DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力以及Fe3+还原力测定了消化产物的抗氧化活性。胃消化产物多酚含量以及抗氧化能力有所下降,而肠消化产物多酚含量显著下降而抗氧化能力显著上升(p<0.05)。(3)百合鳞茎多酚体外抗氧化及调节脂代谢研究。采用0.5mM油酸(Oleic acid,OA)诱导HepG2肝细胞建立体外非酒精性脂肪肝模型。结果表明:200μg/mL和400μg/mL的LBP明显减少了细胞中脂质积累,并呈现剂量依赖性。LBP显著降低了 OA诱导的HepG2细胞内丙二醛(MDA)含量和ROS水平(p<0.05),显著提高了细胞内线粒体膜电位水平(p<0.05)总抗氧化能力(T-AOC)以及(超氧化物歧化酶)SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和(过氧化氢酶)CAT的活性(p<0.05)。此外,LBP抑制了OA诱导后细胞内总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-c)水平的升高(p<0.05),且呈一定的剂量依赖型。结果表明LBP提高了 OA诱导的HepG2细胞内抗氧化水平,并抑制了细胞内的脂质积累。(4)百合鳞茎多酚体内抗氧化及调节脂代谢研究。通过小鼠高脂饮食建立体内非酒精性脂肪肝模型。用不同浓度LBP(150 mg·kg-1·d-1LBP和300 mg·kg-1·d-1)干预高脂饮食(High fat diet,HFD)喂养的小鼠12周。结果表明,LBP可以显著降低由HFD导致的小鼠体重增加和肝脏脂质变性,并显著改善氧化损伤,提高小鼠血清和肝脏中T-AOC、SOD、GSH-Px、CAT水平,降低MDA含量。此外,LBP显著改善了血清和肝脏中TC、TG、HDL-c、LDL-c水平,下调了脂肪生成基因(SREBP-1c,FAS、ACC1、SCD1)的表达,同时上调脂质氧化基因(SRBI、HL、PPARα、CPT-1)的表达。LBP还可能通过调节肠道微生物群落的多样性、丰富度以及短链脂肪酸含量(Short-chain fatty acids,SCFAs)含量来缓解高脂饮食引起的脂质代谢异常。
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