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【研究背景与目的】脉络膜新生血管（CNV）是湿性年龄相关性黄斑变性（nAMD）的主要病理特征,是引起视力不可逆性急剧下降的主要原因。抗血管内皮细胞生长因子药物作为目前最有效的新生血管治疗手段,缓解症状的同时,大部分患者仍然面临治疗抵抗和复发,因此亟需寻找新的或联合治疗靶点。既往研究认为人体固有免疫系统失衡尤其是巨噬细胞M2极化在CNV形成中至关重要,但机制仍不清楚。因此,干预巨噬细胞极化有望成为CNV治疗的新途径。而CHI3L1蛋白通过调控肿瘤巨噬细胞分化,促进病理性血管生成,因此,本课题拟通过建立激光诱导小鼠CNV模型和相关巨噬细胞极化模型,进一步探讨CHI3L1蛋白功能,了解巨噬细胞M2极化机制及干预后对CNV形成的影响,为CNV治疗开拓新的思路。【方法】（1）临床收集nAMD病人血浆检测CHI3L1蛋白水平。（2）建立激光诱导的C57BL/6J小鼠CNV模型,收集视网膜色素上皮（RPE）-脉络膜组织,采用western blots、real time PCR和免疫荧光方法检测CHI3L1表达和巨噬细胞极化状况。（3）体外CHI3L1蛋白诱导巨噬细胞极化,采用western blots和real time PCR、siRNA基因敲除、磁珠分选COIP等方法检测CHI3L1在巨噬细胞极化中的作用及机制。（4）通过体外培养RF/6A细胞系观察CHI3L1及VEGFA以及二者联合和加入各自抑制剂后对管腔形成的影响。（5）建立激光诱导小鼠CNV模型,玻璃体注射mAY（CHI3L1中和抗体）,anti-VEGFA,二者联合注射,与IgG,PBS组对比,通过眼底荧光血管造影（FFA）、免疫荧光染色、脉络膜铺片和频域光相干断层扫描技术（SD-OCT）检测其对巨噬细胞M2分化及CNV形成的影响。【结果】（1）nAMD患者血清中CHI3L1表达升高。（2）M2型巨噬细胞极化指标（Arg-1、Ym-1）在激光诱导小鼠CNV模型组织中第3和第7天高表达,差异有统计学意义(***P<0.001),M1型巨噬细胞极化指标（Cox-2,iNOS）的表达相对于第1天,第3天和第7天明显减少。（3）CHI3L1可以结合巨噬细胞表面受体IL13-Rɑ2,活化MAPK和AKT磷酸化通路。重组CHI3L1刺激巨噬细胞24小时后,M2型巨噬细胞极化指标Arg-1、Ym-1高表达,VEGFA表达升高(***P<0.001),M1型巨噬细胞极化指标Cox-2和iNOS表达变化不明显。细胞转染IL13-Rɑ2受体siRNA后再予CHI3L1刺激可以明显减少Arg-1、Ym-1的表达(***P<0.001)和MAPK/ERK和AKT通路的活化。（4）CHI3L1和VEGFA均可促进RF/6A内皮细胞管腔形成,二者联合则更加明显地促进管腔形成,加入二种抑制剂后管腔抑制较单独加入其抗体更加明显。（5）mAY可以明显抑制M2分化及第7天小鼠CNV形成,联合抗VEGFA则效果更优。【结论】（1）nAMD患者血清中CHI3L1表达升高,与是否应用抗VEGFA治疗无关;（2）小鼠CNV形成过程中局部浸润的巨噬细胞发生M2型极化,CHI3L1是其重要刺激因素;（3）CHI3L1可以在体外促进内皮细胞管腔形成,与VEGFA联合应用则促管腔作用进一步增强;（4）CHI3L1通过结合IL13-Rɑ2受体活化MAPK/ERK和AKT通路进而促进巨噬细胞M2极化;（5）CHI3L1抑制剂mAY可以通过调节巨噬细胞M2型极化,抑制CNV,联合抗VEGFA则进一步抑制CNV形成。