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鸡大肠杆菌病是由鸡致病性大肠埃希氏菌引起，以急性败血症、心包炎、肝周炎和腹膜炎为特征的一类传染病，一年四季均有发生，给养殖业带来了巨大的经济损失。鸡致病性大肠杆菌通过呼吸道进入肺部，并通过黏附因子黏附肺上皮细胞，尤其是肺II型上皮细胞，造成黏附和擦拭性（A/E）损伤，从而突破“气血屏障”进入血液循环导致败血症。香芪汤是由香附、黄芪和穿心莲组成的中药方剂，前期研究证明其对鸡大肠杆菌病具有良好的防治作用，有效成分主要有α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯等。因此，我们拟从细菌与宿主相互作用造成宿主细胞A/E损伤（黏附损伤和炎性损伤）角度入手，研究香芪汤有效成分α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯对鸡致病性大肠杆菌黏附鸡肺II型上皮细胞造成A/E损伤的调节作用。采用13日龄的健康海兰褐蛋鸡鸡胚，利用胰酶和Ⅳ型胶原酶联合消化法分离纯化获得鸡肺II型上皮细胞。利用碱性磷酸酶染色法和透射电镜法进行鉴定，证明该细胞为鸡肺II型上皮细胞。应用鸡致病性大肠杆菌O78菌株感染鸡肺II型上皮细胞，建立鸡致病性大肠杆菌O78黏附鸡肺II型上皮细胞的损伤模型，通过涂板计数法和激光共聚焦法研究发现，鸡致病性大肠杆菌O78可以黏附鸡肺II型上皮细胞，且具有时间和浓度的依赖性。在鸡致病性大肠杆菌黏附鸡肺II型上皮细胞的损伤模型基础上，采用涂板法、电镜法、流式细胞术、激光共聚焦法和RT-PCR法，研究α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯对鸡致病性大肠杆菌O78造成鸡肺II型上皮细胞黏附损伤的抑制作用。结果发现α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯能够显著抑制鸡致病性大肠杆菌O78菌株黏附鸡肺II型上皮细胞的数量，降低致病菌对细胞的损害，增加鸡肺II型上皮细胞的F-actin表达量，抑制细胞骨架重排。这与α-香附酮抑制Nck-2、CDC42、Rac1基因表达，黄芪甲苷抑制Nck-2、CDC42、Rac1和RhoA基因表达，穿心莲内酯抑制RhoA基因表达有关。在鸡致病性大肠杆菌O78黏附鸡肺II型上皮细胞的损伤模型基础上，采用ELISA和RT-PCR法研究α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯对鸡致病性大肠杆菌O78诱导鸡肺II型上皮细胞炎性损伤的调节作用。结果发现α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯能够显著抑制促炎因子TNF-α、IL-1β的分泌，促进抑炎因子IL-10、IL-4的分泌，α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯能够显著抑制TLR-4mRNA的表达，黄芪甲苷和穿心莲内酯能够显著抑制TLR-5mRNA的表达。α-香附酮和黄芪甲苷能够显著抑制ERK和P38的表达水平，穿心莲内酯能够显著抑制JNK的表达水平。综上所述，香芪汤有效成分α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯可以显著抑制鸡致病性大肠杆菌O78对鸡肺II型上皮细胞的黏附，减少鸡致病性大肠杆菌O78诱导细胞的黏附损伤和炎性损伤，为中药防治鸡大肠杆菌疾病提供新的依据。