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新城疫(Newcastle disease，ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性传染病。ND主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、粘膜和浆膜出血。ND的病原属于副粘病毒科副粘病毒亚科腮腺炎病毒属，它的宿主范围广泛，可以感染禽类50个目中的27个。近几年，非典型ND发生的比率升高，并有不断加重的趋势，该病发病急、致死率高，对养禽业的发展构成严重威胁。 本研究根据已发表的鸡IFN-γ、IL-2、IL-6、β-actin基因序列用Oligo 6.1和Primer 5.0软件设计了7对引物，采用RT-PCR的方法从脾脏和外周血单个核细胞(PBMC)提取的总RNA中分别扩增了鸡细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-6的部分序列，通过序列测定进行验证后，对上述细胞因子的mRNA进行了定量检测，建立了鸡细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-6 mRNA表达量的RT-PCR检测方法。应用我们所建立的方法在NDV病毒多肽疫苗和不同结构CpG与新城疫疫苗联合免疫鸡后，对IFN-γ、IL-2、IL-6的动态变化进行监测。 NDV免疫试验结果表明，与空白对照组相比，接种V4全病毒与LaSota P5段纯化多肽的实验组IFN-γ mRNA的表达量变化不大(P＞0.05)，其它各实验组IFN-γ mRNA的表达量都有大幅下降。 CpG与NDV联合免疫试验结果表明，与NDV对照组相比，直链CpG实验组的NDV特异性细胞因子表达水平最高，免疫增强效果最明显(P＜0.05)；而茎环CpG实验组的NDV特异性细胞因子表达水平没有明显升高，免疫增强效果不明显(P＞0.05)。直链CpG实验组IL-6 mRNA表达量远远的高于其他实验组，在三种细胞因子中，IL-6 mRNA表达量一直处于整个实验组的最高水平。 总之，本实验成功地建立了鸡细胞因子mRNA表达量的RT-PCR检测方法，并对NDV免疫鸡外周血单个核细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-6 mRNA表达量的动态变化进行了研究。同时作为一个很好的免疫模型，这种检测方法还具有容易评价和比较分析的优点。总之，本研究将有助于进一步研究新城疫疫苗免疫后复杂的免疫应答变化及新型佐剂CpG的免疫增强效果，从而为新城疫的防治奠定基础。