不同饲料饲养家蚕其肠道微生态优势菌群的类型组成及差异性研究

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家蚕是鳞翅目中重要的经济昆虫,蚕业为我国的国民收入作出了具大的贡献,但在蚕业生产过程中叶丝转化率低这一问题至今都还困扰着我们。另外,饲养家蚕过程中,因疾病、缺桑导致大量倒蚕、减产等现象都是造成蚕丝利用率低的主要原因。因此,通过多种渠道提高家蚕对桑叶的利用率、减少疾病的发生,是我们迫切需要解决的问题。在做到提高桑叶质量,对蚕种进行育种改良的同时,调节和改善家蚕肠道微生态环境亦是不可忽视的另一方面。因此,我们更应该重视研究家蚕肠道微生态菌群及其代谢产物对家蚕产生的影响,它们在抵抗病原微生物侵袭中的作用,鳞翅目昆虫的生长发育及抗病性与肠道微生态状况的关系,以及不同饲料饲养条件下肠道微生态优势菌群类型的变化和差异给宿主带来的影响,并初步探讨微生物同微生物之间的相互作用,为研究优势菌群菌种在蚕肠道中的功能和作用奠定基础。本试验以不同的桑科植物柘叶与桑叶分别饲养家蚕为材料,采用纯培养分离检测技术、16S rDNA序列测定和系统发育分析方法,对4、5龄家蚕肠道优势菌群的类型进行了分离鉴定和差异性分析,并对两种饲料饲养的肠道微生物之间的关系进行了初步研究。实验结果如下:1.从两种饲料喂养的家蚕肠道中共分离到优势菌56株,其中从柘叶饲养家蚕肠道中分离出29株,从桑叶饲养的家蚕肠道中分离出27株,根据菌落形态、菌体特征、生理生化特征以及16S rDNA分子鉴定可将56株菌株归为12个类群,分别属于短波单胞杆菌属(Brevundimonas)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、气单胞菌属(Aeromonas)、短杆菌属(Brevibacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)和芽孢杆菌属(Bacillus)。2.柘叶与桑叶饲养家蚕肠道中共有的优势菌群仅有4个类群,为短波单胞杆菌属(Brevundimonas)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、肠杆菌属(Enterobacter)和葡萄球菌属(Staphylococcus);从桑叶饲养家蚕肠道中还检索到的优势菌群有气单胞菌属(Aeromonas)、短杆菌属(Brevibacterium)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)和克雷伯氏菌属(Klebsiella)5个类群;而从柘叶饲养家蚕肠道中检索到的优势菌群仅有假单胞菌属(Pseudomonas)和土壤杆菌属(Agrobacterium)2个类群;芽孢杆菌属(Bacillus)只从四龄家蚕肠道中分离得到。结果显示不同饲料喂养家蚕后肠道微生态优势菌群类型的组成出现了较大的差异,桑叶饲养家蚕的肠道优势菌群比柘叶饲养家蚕肠道中的优势菌群类型丰富。3.将柘叶饲养家蚕肠道中分离的一些菌和桑叶饲养家蚕肠道中分离的菌混合饲养家蚕,发现其中某些组合的菌群在饲养家蚕后24小时内,引起蚕发生严重的吐液、摆头等症状,然后群体死亡,3次重复试验均表现出相同现象,试验结果暗示不同植物饲料导致家蚕肠道微生态优势菌群类型组成的变化可能是肠道微生态结构性的改变,它与同种饲料饲养家蚕龄期间微生物的变化有质的不同,推测这种肠道微生态结构性的改变与柘叶饲养表现为家蚕生长发育不良、容易患病具有相关性,引起了我们对脓病发生机制新的关注,有必要从多角度研究和探讨家蚕脓病发生机制。
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