紫杉醇对LASEK术后角膜Haze形成影响的研究

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目的:探讨紫杉醇(Paclitaxel商品名taxol)抑制兔眼接受准分子激光上皮下角膜磨镶术(laser subepithelial keratomileusis,LASEK)后角膜上皮下形成雾状混浊(haze)的作用。方法:1建立兔眼LASEK模型,取健康的新西兰大白兔36只,排除眼部疾患后,对大白兔行双眼-10.0D的LASEK手术2采用随机分组的方法,分成三组,对照方式采用自身对照。分别为第一组:术中0.3mg/m L紫杉醇治疗组,第二组:术中0.02%MMC治疗组,第三组:平衡盐液(Balance saline solution,BSS)阴性对照组,每组12只兔(24只眼)。分别于术后1周、1月、3月在各组分别随机选取4只(共8只眼),借助裂隙灯,定期观察兔眼角膜上皮愈合的进程,眼部体征以及评估haze程度。另外分别于术后1周、1月、3月取兔角膜组织用作病理组织学观察,及透射电镜检查,进行免疫组织化学研究,了解角膜组织中TGF-β1的含量。结果:1 LASEK术后裂隙灯显微镜检查结果显示:术后兔角膜上皮均在一周内愈合良好,经统计学分析无差异(P>0.05)。术后1周、1月、3月,Haze分级水平组间比较差异均有统计学意义(P<0.01),第一组和第二组的Haze程度比BSS组低(P<0.01),但是紫杉醇组和丝裂霉素组两组之间相比,Haze程度差异无统计学意义(P>0.05);术后3月三组间比较无统计学意义(P>0.05)。2角膜病理组织切片观察:准分子激光手术后定期光镜下观察发现,各组角膜上皮层均有明显程度的增厚,上皮细胞层数增加,紫杉醇组和MMC组术区出现了少量角膜基质细胞在角膜基质内聚集现象,BSS组则没有。术后1周,对照组术区中央角膜上皮细胞有增生,基质层表面成纤维细胞呈活跃状态,数量增多,纤维排列紊乱,炎症细胞增加,基质层中TGF-β1的表达明显比紫杉醇组及MMC组均高(P<0.01);MMC组术区角膜基质层中TGF-β1的表达较紫杉醇组均高(P<0.01),术后1月,紫杉醇组和MMC组组织结构均趋于正常,连续并较完整。而BSS组术区中央角膜上皮细胞增生明显,基底细胞大小不一,胶原纤维增生、排列紊乱明显,纤维间隙较大,而术后角膜基质层中TGF-β1的表达水平随时间延长而成下降趋势。3角膜超微结构的观察:与丝裂霉素组和BSS组相比,紫杉醇组术后角膜前基质有较少的成纤维细胞,角膜基质层胶原纤维直径相近,排列规则,成纤维细胞体积小,细胞器也不多,状态稳定。结论:紫杉醇能够显著减少LASEK术后兔眼早期角膜基质层TGF-β1的表达水平,从而对角膜haze的形成有明显的抑制作用,其疗效与丝裂霉素相同,可减少纤维化反应,形成较少的角膜Haze,使角膜保持透明。本研究结果提示了紫杉醇应用于防治LASEK术后角膜haze的可行性和临床意义。
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