辐射诱变无籽红1-7甜橙的无籽成因研究及ISSR分子标记分析

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无籽红1-7甜橙是由普通有籽红1-7甜橙经过60Co-γ射线诱导后选育的新品种,具有无籽、低酸等优点,对鲜食和加工有重要意义,但其无籽成因不清楚。本研究以普通有籽红1-7甜橙及其突变体无籽红1-7甜橙为材料,采用改良卡宝品红染色法压片观察花粉母细胞减数分裂过程,切片观察小孢子的发育过程,组织压片法观察无籽红1-7甜橙自交和异交的授粉受精过程,石蜡切片观察无籽红1-7甜橙的胚囊结构及自交和异交胚胎的发育情况,并用ISSR分子标记分析无籽红1-7甜橙与有籽红1-7甜橙的基因组水平上的差异,对无籽红1-7甜橙的无籽成因进行了研究。主要研究结果如下:1.无籽红1-7甜橙花粉母细胞减数分裂异常,花粉生活力和萌发力均较弱,育性低,花粉粒形态大小与有籽红1-7甜橙的差异较大,表现出高度畸形。推测雄性不育可能是无籽红1-7甜橙无籽的主要原因。2.无籽红1-7甜橙自交和异交授粉后花粉管在柱头、花柱中都能正常生长,但是授粉后10 d仍未在自交和异交授粉的子房中观察到花粉管,因此推测无籽红1-7甜橙可能需要更长时间才能完成授粉受精过程。3.无籽红1-7甜橙开花当天仍有大部分胚囊处于单核期、二核期和三核期,胚囊败育率为89.9%,而有籽红1-7甜橙胚囊败育率仅为48.9%,二者之间有显著性差异。4.无籽红1-7甜橙自交和异交授粉后胚胎发育滞后,大多数胚在球形胚、心形胚阶段停止发育,偶有一两个胚能够发育至子叶胚。胚囊发育滞后直接或间接导致了胚胎中途败育,胚胎中途败育是无籽红1-7甜橙无籽的原因之一。5.对无籽红1-7甜橙和有籽红1-7甜橙进行了ISSR分子标记分析,从100条引物中筛选出了47条多态性引物,其中3条引物能够在无籽红1-7甜橙中扩增出特异性条带。说明无籽红1-7甜橙与有籽红-7甜橙在基因组DNA水平上存在差异。
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