【摘 要】
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基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用,从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。理想的基因治疗体系
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基因治疗是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用,从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。理想的基因治疗体系应该具有高效的靶向性基因导入系统、基因表达的可控性及更多更好的治疗基因。本文采用已商品化的5型腺病毒作为载体,在HI-loop区插入RGD基因序列,提高靶向性,在E1 E3缺失区插入survivin启动子调控腺病毒的E1基因,实现腺病毒肿瘤细胞内靶向增殖,再通过COX-2启动子调控的双自杀基因TK-IRES-NTR实现肿瘤特异性杀伤的目的。本文构建了3个重组腺病毒质粒,其中对Ad-RGD-SUR-E1进行包装,扩增,纯化。体外实验表明,Ad-RGD-SUR-E1能够在ZR-75-30(乳腺管癌细胞)中复制,具有较强的细胞杀伤活性,而在正常细胞CCD-11-Lu中的复制能力和细胞杀伤能力均明显减弱。证明了Ad-RGD-SUR-E1的选择性复制能力,为下一步条件复制型腺病毒作为载体应用于基因治疗提供了依据和参考。
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