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目的:为了明确化积健脾汤治疗单纯性肥胖小鼠的药效,探究其对单纯性肥胖小鼠糖脂代谢功能和瘦素抵抗的作用及机制问题,本研究以高脂饮食喂养建立单纯性肥胖小鼠动物模型,分析造模成功的相关指标,以中药方剂化积健脾汤进行治疗,西药奥利司他为阳性对照,分析化积健脾汤对小鼠体重、Lee’s指数、血糖、胰岛素、血脂、FFA、肝脏及脂肪组织的形态结构、脂肪因子和JAK2-STAT3信号通路中相关基因表达等的影响。评估化积健脾汤减肥的药效并初步明确化积健脾汤治疗单纯性肥胖小鼠的可能作用机制,为临床中单纯性肥胖症的治疗提供基础实验依据。方法:1.将100只3周龄的C57BL/6N雄性小鼠适应性饲养一周后随机分为两组:正常组20只(用维持饲料喂养)和模型组80只(用高脂饲料喂养)。连续喂养10周且每周称量两组小鼠的体重并记录,造模10周后测量两组小鼠的体长、腰围并计算Lee’s指数;采用micro-CT检测两组小鼠的脂肪分布及体积;全自动生化分析仪检测小鼠肝功能酶、血糖和血脂水平并分别对两组小鼠进行GTT和ITT实验;在每组中随机抽取10只进行解剖,取其脏器快速称量后保存并计算各组脏器系数;石蜡切片法观察分析两组小鼠肝脏和脂肪组织的形态结构差异。2.造模10周后进行分组,将小鼠分为6组,分别为正常组,模型空白组,阳性对照组,化积健脾汤高、中、低剂量组,每组各10只。每天早上9:00分别对各组小鼠进行灌胃治疗,阳性对照组用西药奥利司他,中药治疗组分别用高、中、低不同浓度的化积健脾汤治疗,正常组及模型空白组均给予相应体积的蒸馏水。给药期间,除正常组以外,其余各组小鼠仍以高脂饲料喂养。3.药物干预6周后,比较各组小鼠的体重、体长、腰围和Lee’s指数;通过micro-CT检测各组小鼠脂肪体积;GTT和ITT检测各组小鼠葡萄糖耐量异常(IGT)和胰岛素抵抗(IR)的情况;全自动生化分析仪检测各组小鼠肝功能酶、血糖和血脂的水平;ELISA试剂盒检测各组小鼠INS和FFA表达水平;在各组小鼠解剖时称取脏器组织湿重并计算其脏器系数;石蜡切片法观察分析各组小鼠肝脏和脂肪组织的形态结构差异。4.ELISA试剂盒检测各组小鼠血清中Lep、ADP和IL-6表达水平;采用RT-qPCR法检测肝脏和脂肪组织中LepRb、SOCS-3、JAK2和STAT3mRNA的相对表达水平。结果:1.造模10周后,模型组小鼠的体重迅速增加,体型变大,其体重、体长、腰围、Lee’s指数均比正常组小鼠高(P<0.05);脂肪体积、脂肪组织湿重和系数相较正常组均增高(P<0.05);肝脏组织湿重、肝功能酶AST和ALT水平均高于正常组(P<0.05);GLU、TC、HDL、LDL和VLDL血糖血脂水平均高于正常小鼠(P<0.05),通过GTT和ITT实验发现模型组小鼠在每个检测的时间节点血糖值都比正常组高(P<0.05),出现了IGT和IR的现象;并且模型组小鼠的肝细胞出现脂肪变性,脂肪细胞体积明显增大并伴有炎性细胞浸润的情况。2.药物干预6周后,与模型空白组比,各给药组小鼠的体重、腰围、Lee’s指数及脂肪体积均下降(P<0.05),脂肪组织湿重和脂肪系数也降低(P<0.05);小鼠的肝脏组织湿重、肝功能酶AST和ALT水平降低(P<0.05);血脂TC、HDL、LDL和VLDL水平均下降(P<0.05),FFA水平下降(P<0.05);各给药组小鼠的GLU、INS水平降低(P<0.05),并且通过GTT、ITT实验得出各给药组均可在一定程度上改善小鼠的IGT和IR现象,其中西药改善IGT的效果较好,中药高剂量改善IR的效果最为显著。3.相较于正常组,模型空白组小鼠的肝细胞出现严重的脂肪变性,脂肪细胞体积明显增大且大小不均,并伴有明显的炎性细胞浸润。药物治疗后,各给药组小鼠的肝脏及脂肪组织形态结构相较于模型空白组均有不同程度的好转,其中化积健脾汤高、中剂量组能有效治疗小鼠肝细胞出现的严重脂肪变性,显著降低脂肪细胞出现的体积肥大等情况。4.相较于正常组,模型空白组小鼠的Lep和IL-6水平升高(P<0.05),ADP水平降低(P<0.05)。药物治疗后,与模型空白组比,各给药组小鼠的Lep和IL-6水平均降低(P<0.05),ADP水平升高(P<0.05)。5.与正常组比,模型空白组小鼠肝脏和脂肪组织中LepRb、JAK2和STAT3mRNA的表达水平下降(P<0.05),SOCS-3表达水平升高(P<0.05)。药物治疗后,相对于模型空白组,高、中剂量的化积健脾汤可有效提高组织中LepRb、JAK2和STAT3的表达水平(P<0.05),且高、中、低剂量组均可降低SOCS-3的基因表达水平(P<0.05),而阳性对照组中SOCS-3的表达水平与模型空白组比无差异(P>0.05)。结论:1.高脂饮食10周后,模型组小鼠的体重、体脂和血糖血脂水平均明显上升,并出现IGT、IR、肝细胞脂肪变性和脂肪细胞体积增大等问题,说明饮食诱导的单纯性肥胖小鼠体脂含量增多,出现了脂质沉积和糖脂代谢紊乱等现象。2.给予化积健脾汤治疗后,化积健脾汤可抑制小鼠的体重增长,降低小鼠的Lee’s指数和体脂含量;化积健脾汤可通过降低小鼠血糖和胰岛素的水平、改善IGT和IR以及降低血脂和FFA水平,达到有效调控肥胖小鼠的糖脂代谢紊乱。3.化积健脾汤能有效治疗小鼠肝细胞出现的严重脂肪变性,减少体内脂肪的异位沉积,降低小鼠脂肪细胞的大小和体积,减轻炎性细胞浸润的情况,达到减肥降脂的作用。4.化积健脾汤可降低小鼠Lep水平,升高ADP水平,并能同时降低IL-6表达水平,起到改善小鼠高瘦素血症,并在一定程度上减轻小鼠慢性炎症状态和IR程度,起到调节能量稳态,改善机体代谢紊乱的作用。5.化积健脾汤可以通过增加肝脏和脂肪组织中LepRb的基因表达量,增加Lep与LepRb的结合力,进一步激活Lep介导的JAK2-STAT3信号传导通路,通过上调肝脏和脂肪组织中LepRb、JAK2和STAT3的基因表达,下调SOCS-3的基因表达,从而改善瘦素抵抗,起到减肥降脂的作用。