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放射治疗是恶性肿瘤治疗的主要手段之一,在恶性肿瘤综合治疗中发挥了举足轻重的作用,有报道称60%的肺癌患者需要放疗,食管癌等其他胸部肿瘤也需要接受放射治疗。胸部肿瘤接受放射治疗常见的不良反应为放射性肺损伤(radiation-induced lung injury),放射性肺损伤是正常肺组织受到照射后发生的炎性反应。近十年,放射治疗技术的发展取得了质的飞跃,随着先进放疗技术的临床应用,放射性肺损伤发生率有所下降,但仍是胸部肿瘤放疗不可避免的不良反应,放射性肺损伤成为限制靶区剂量的主要因素之一。由于对放射性肺损伤的认识不足,目前在该病的治疗方面仍无有效手段,如何有效防治放射性肺损伤仍是医学界亟待解决的难题之一。随着对放射性肺损伤研究的不断深入,大家都认识到放射性肺损伤的形成过程非常复杂,需要多种细胞及因子参与和相互作用,目前已经实验证实的有IL-1、IL-6、TGF-β、TNF-a等因子参与了放射性肺损伤的发生过程,而以IL-6,、TGF-β、TNF-a等作为靶点治疗,可有效防止或减轻放射性肺损伤的发生。我们想是否还有其他细胞因子参与放射性肺损伤,在放射性肺损伤的发生过程中发生重要作用。趋化因子(Chemokines)是一种低分子量多肽(多为8-10KD),目前已知的有50多种,它们的分子结构前端均有四个半胱氨酸,目前根据前两个半胱氨酸间是否存在其他氨基酸而被分为四个家族,也就是CC、CXC、C及CX3C,单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),属于C-C亚族成员,是一种炎症反应的始动因子,能趋化单核细胞向炎症部位聚集,在炎症反应中起着重要作用,同时可以引起巨噬细胞、中性粒细胞、单核细胞及活化的T淋巴细胞聚集,从而介导炎性发生发展的整个过程。有动物实验证实MCP-1在小鼠获得性肺炎及小儿支原体肺炎等均有较高表达,我们推测该因子在放射性肺损伤的发生过程中亦起到举足轻重的作用,而文献检索尚未发现该方面报道,因此我们通过建立放射性肺损伤的动物模型,检测小鼠早期放射性肺损伤发生过程中MCP-1的表达情况,从而探讨MCP-1在放射性肺损伤发生过程中作用,为放射性肺损伤的防治提供一个新的有效的治疗靶点。目的本课题通过研究小鼠早期放射性肺损伤发生过程中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达水平,以及MCP-1在放射性损伤肺组织中的转录水平,分析MCP-1与放射性肺损伤之间的关系,探讨其在放射性肺损伤中发挥的作用。方法将40只C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假照射组(10只),照射组(30),对照射组小鼠进行一次性大剂量(15Gy)胸部照射,分别于照射后1d、10d、30d各处死10只,并收集处死小鼠肺组织。运用Real-time-PCR技术检测肺组织MCP-1 mRNA的表达水平,酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清中MCP-1含量,Western blot法检测肺组织蛋白表达情况,HE染色后光镜下观察肺组织病理形态变化。结果1、对小鼠肺组织H-E染色后光镜下观察发现照射后10天肺组织出现炎性表现,30天炎性表现加重。2、MCP-1免疫组化显示,照射后小鼠肺组织MCP-1表达随着时间延长而逐渐增强。3、RT-PCR结果显示,对照组、RT1d组、RT10d组、RT30d组小鼠肺组织MCP-1mRNA相对表达水平存在显著差异,RT1d组表达水平明显高于对照组,RT10d组高于RT1d组,RT30d组高于RT10组。4、ELISA结果显示,照射后小鼠血清中MCP-1含量随时间延长逐渐升高。5、Western blot检测结果显示,照射后小鼠肺组织蛋白表达情况随着时间延长而逐渐增强。结论小鼠接受全胸照射后,肺组织MCP-1 mRNA及蛋白表达均出现不同程度的升高,考虑MCP-1参与了小鼠早期放射性肺损伤的发生过程。