据报道,我国恶性肿瘤的发生率和病死率呈逐年上升的趋势,每年约有140万人死于恶性肿瘤,而肺癌又是最常见的恶性肿瘤之一,它的发生发展是一个非常复杂的过程,并且发病机制尚不明确,已然成为人类健康的头号杀手。蛋白质是生命过程的本质体现者,若能对蛋白质组进行研究,将会对肺癌的发生发展机制提供更直接的线索,对肺癌的临床诊断和治疗有着非常重大的意义。本研究以小鼠组织为材料,用经典的双向电泳-质谱技术方法来对其进行差异蛋白质组学研究。主要内容如下：1.取正常小鼠和接种肺癌A549细胞系的小鼠组织,用液氮研磨、超声破碎等方法来提取蛋白质,经Bradford法蛋白定量以后,用双向凝胶电泳技术来分离正常组织和接种组织中的蛋白质,染色后扫描拍照获取图片,软件分析找出差异蛋白点,并用MALDI-TOF/TOF-MS/MS来鉴定差异点。2.建立了小鼠组织样品中蛋白质的提取及纯化方法,调整和优化了双向凝胶电泳技术的条件,最终将IPG胶条定为pH4-7.18cm,上样量定为200μg。形成了相对稳定的组织蛋白质2-DE分离方法,对后续蛋白质的分离、鉴定、筛选肺癌的生物标志物奠定了较好的基础。3.在优化的实验条件基础之上,得到了较好的鼠肝组织的双向电泳图谱,形成了比较稳定的组织蛋白质2-DE分离方法。用ImageMaster2D Platinum6.0软件分析找出差异点,差异点经脱色和酶解等步骤后采用MALDI-TOF/TOF-MS/MS质谱技术来鉴定,初步得出与细胞信号通路相关的蛋白Prxl、与生物体能量代谢有关的蛋白NDUFV2、与细胞分裂和移动有关的蛋白MYL12B,它们可能对肺癌的诊断和治疗起着一定的参考价值。