研究背景白内障是多因素引起的晶状体混浊,是第一位致盲眼病。丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路参与多种应激反应, p38是其家族成员之一,它主要参与高渗透压、高糖、炎症等引起的细胞应激反应。凋亡是各种非先天性白内障共同的细胞基础。虽然有研究显示凋亡存在于半乳糖性白内障的晶状体上皮细胞中,半乳糖激活p38,尚没有研究证实半乳糖诱导的p38激活与凋亡直接相关。目的本研究将利用体外培养的胚胎鸡晶状体培养系统,建立半乳糖性白内障模型,探讨p38激活与晶状体上皮细胞凋亡的关系,及其在白内障形成中的作用。方法用30mmol/L半乳糖在体外培养的鸡胚胎晶状体上诱导半乳糖性白内障模型(对照组),在培养的10天里,通过每日观察、照相、计算晶状体的混浊面积,并用Western Blot检测晶状体中磷酸化p38的表达;用p38特异性抑制剂SB203580抑制p38活性,观察其对晶状体混浊程度的影响;通过对晶状体细胞膜(WGA)及细胞核(DAPI)染色,观察晶状体纤维结构和分布变化;利用TUNEL凋亡细胞染色法观察白内障发生中晶状体切片上的凋亡细胞的数量变化,并检测晶状体上皮细胞内caspase-3活性变化。结果30 mmol/L半乳糖能诱导体外培养的鸡胚胎晶状体产生周边部皮质性混浊,随着半乳糖暴露时间的延长,晶状体的混浊面积增加,p38抑制剂SB203580能有效减轻半乳糖性晶状体的混浊。半乳糖性白内障晶状体切片显示赤道部晶状体纤维结构紊乱、晶状体纤维细胞分化异常,而p38抑制剂能够减轻这些组织学改变。TUNEL原位凋亡细胞检测显示,在半乳糖处理的d2、d5和d10天,晶状体凋亡细胞比例明显增加,分别为1.7%、4.5%和12%,而SB203580明显阻止晶状体细胞的凋亡,在相应时间点凋亡细胞比例降至0.7%、1.5%和1.4%。与此结果对应,caspase-3活性在半乳糖性白内障发生中明显升高,在培养的第d2,d5和d10天,分别是胚胎10天正常晶状体(E10)的8.5,19.5和41.9倍,而抑制P38的活性后caspase-3活性明显减低,为E10的3,7.8和26.9倍。结论抑制p38的激活能减轻半乳糖性白内障的发生。p38诱导caspase-3激活的细胞凋亡途径参与半乳糖性白内障的形成。