华山新麦草(Psathyrostachys huashanica)是小麦重要的野生近缘种之一,具有抗病、抗逆等优良性状,使其成为小麦远缘杂交育种研究中宝贵的优质基因来源。本研究利用牙签嵌入接种法对53份普通小麦和小麦-华山新麦草衍生后代材料进行纹枯病抗性鉴定,并结合分子细胞学特征对筛选出的抗病材料进行初步鉴定;利用RAPD标记转SCAR标记技术和附加有华山新麦草1Ns-7Ns染色体组的小麦-华山新麦草异附加系材料开发能在小麦背景中对华山新麦草Ns染色体进行识别检测的特异SCAR标记。实验获得如下结果:1.小麦-华山新麦草衍生后代纹枯病抗性评价与细胞学鉴定苗期小麦纹枯病人工接种鉴定结果表明,不同材料对纹枯病的抗性有较大的差异,病情指数的变异范围为20.0%-82.0%。抗病等级表现为抗病(R)及以上的材料11份,占全部供试材料的21.6%,平均病情指数为26.8%。表现中抗(MR)的材料27份,占全部供试材料的52.9%,平均病情指数为46.9%。表现中感(MS)或感病(S)的材料13份,占全部供试材料25.5%,平均病情指数为61.9%。对11份抗病材料进行根尖细胞有丝分裂中期染色体细胞学观察,所有材料根尖细胞均含有42条染色体,经基因组原位杂交(GISH)鉴定,没有发现杂交信号。但抗病材料的农艺性状和其亲本7182有显著的差异,初步分析推断这些材料为华山新麦草小片段的易位材料并有望在小麦抗纹枯病育种过程中加以利用。2.小麦-华山新麦草附加系RAPD标记扩增的特异片段筛选与SCAR标记转化用180条RAPD随机引物R1-R180(10 bp),对附加有华山新麦草1Ns-7Ns染色体组的小麦-华山新麦草异附加系材料进行筛选,有5个RAPD引物分别在1Ns、2Ns、4Ns、5Ns附加系中有特异扩增。对特异片段进行切胶纯化,利用分子克隆技术扩增特异片段并测序。经测序得到特异片段的序列,提交NCBI植物基因组数据库中比对,设计出5对SCAR引物并在材料中进行验证。新设计的SCAR引物S2Ns-131在小麦-华山新麦草2Ns附加系和华山新麦草基因组DNA上有特异性扩增,而未在亲本7182中扩增出条带。从而证明R131已经成功转化为SCAR标记S2Ns-131,可以用于特异性检测华山新麦草2Ns染色体。