【摘 要】
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目的:研究养阴润目丸对干眼兔泪腺上皮细胞BCL-2、BAX总蛋白表达的影响。分析养阴润目丸对干眼兔泪腺上皮细胞凋亡发生的干预作用,为临床使用养阴润目丸治疗干眼提供理论基础。方法:1.制备含药血清,将15只健康新西兰兔随机分为3组,用于提取空白、含药血清。适应性喂养后开始予以分别灌胃给药治疗,连续灌胃1周。将实验兔局部消毒后腹主动脉取血,离心后得到分离血清,置于-20℃冷藏备用。2.体外分离、培养及
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目的:研究养阴润目丸对干眼兔泪腺上皮细胞BCL-2、BAX总蛋白表达的影响。分析养阴润目丸对干眼兔泪腺上皮细胞凋亡发生的干预作用,为临床使用养阴润目丸治疗干眼提供理论基础。方法:1.制备含药血清,将15只健康新西兰兔随机分为3组,用于提取空白、含药血清。适应性喂养后开始予以分别灌胃给药治疗,连续灌胃1周。将实验兔局部消毒后腹主动脉取血,离心后得到分离血清,置于-20℃冷藏备用。2.体外分离、培养及鉴定泪腺细胞,无菌条件下摘取兔泪腺组织,体外培养兔泪腺上皮细胞,在荧光显微镜下观察细胞的生长状况。3.分别在LPS和TNF-α的干预下构建干眼细胞模型,对比两种生物学特性。4.在显微镜下进行细胞的形态学观察,用Westen Blot法测定各组细胞中Bc1-2、Bax蛋白的表达。结果:1.通过分离培养的泪腺上皮细胞,进行传代及鉴定,分别采用LPS和TNF-α干预造模,对比两种构建干眼细胞模型的生物学特征,最终采用TNF-α炎性因子建立干眼细胞模型。2.各组对比,养阴润目丸含药血浆作用干眼细胞模型可促进Bcl-2蛋白的表达,同时抑制Bax蛋白的表达。结论:养阴润目丸能有效抑制细胞凋亡,可能是通过调控相关凋亡因子Bcl-2、Bax蛋白的水平来抑制细胞凋亡的,证实细胞凋亡与干眼的发生发展密切相关结论。
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