带蒂脂肪组织复合rhBMP-2应用于兔脊柱融合的实验研究

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目的脊柱融合(Spinal Fusion)是治疗脊柱疾病的主要方法之一,而横突间脊柱融合是脊柱融合的常用方法。目前,临床上常利用自体骨或同种异体骨移植来进行脊柱融合,但是,由于脊柱融合需骨量大,自体骨很难满足临床需要,另外,自体骨还存在塑形困难,术中出血量增多,术后供区疼痛等缺点,而异体骨移植也存在排斥反应,疾病传播等缺点。寻求一种理想的骨移植替代材料成为脊柱融合研究的热点。本实验采用纤维蛋白凝胶(Fibrin Glue,FG)作为载体,与骨形态发生蛋白(Bone Morphogenetic Protein,BMP)复合,用带血管蒂脂肪组织包裹进行兔横突间脊柱融合。检测兔横突间脊柱融合情况,以期为脊柱融合提供更为有效的方法。方法(一)实验动物分组将40只一岁龄日本大耳白兔随机分为2组,每组20只,单纯脂肪组织,脂肪组织复合rhBMP-2组。(二)FG及FG复合rhBMP-2的配制将纤维蛋白、凝血酶、CaCl2等材料按一定方法配制可得到FG,用于对照组,加入rhBMP-2用于实验组。(三)动物模型建立显露左侧第5、第6腰椎横突,以磨钻将其后方骨质磨去,露出松质骨及髓腔,将颈部脂肪分离,翻转、加入FG或FG+rhBMP-2植入动物左侧第5、第6腰椎横突后侧。术后6、8周,处死动物取材,应用大体观察,手法检测,影像学观察,生物力学检测以及组织学观察,对有关数据进行统计学分析结果6周时,脂肪组织复合rhBMP-2组有部分成骨,8周时脂肪组织复合rhBMP-2组有明显骨形成,而单纯脂肪组在6-8周时均没有成骨。讨论骨形态发生蛋白能诱导宿主的间充质干细胞向骨前体细胞分化。BMP在骨发生的过程中主要起3个作用:促进细胞的趋化、有丝分裂和细胞的分化。脂肪组织中除含有大量的成熟脂肪细胞外,还有一些结缔组织基质,这些结缔组织基质存在脂肪基质细胞,其间又存在一些具有多向分化潜能的成体干细胞。它也能分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞和成肌细胞。带蒂的脂肪组织含有血管,因此含有从血管运输来的细胞如间充质干细胞和血管周围的细胞如血管周细胞等,而这两种细胞都是多功能干细胞,在体内和体外具有多种细胞分化能力。本实验采用带蒂的脂肪组织,在分离过程中会破坏脂肪组织内部分小的血管,这样血液中的间充质干细胞就会进入脂肪组织与脂肪基质细胞、血管周细胞一起向成骨细胞转化,形成骨组织。脂肪组织有取材广泛,对机体损伤小的特点。因此利用带血管蒂脂肪组织作为替代材料为脊柱融合提供了更加广阔的前景。结论脂肪组织复合rhBMP-2可以应用于脊柱融合。
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