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目的:探讨供者脾细胞特异性输注联合地塞米松诱导移植物长期存活的机理。方法:1.体内实验:建立Balb/c小鼠到C57BL/6小鼠皮肤移植模型。实验组:受者移植前8天给予Balb/c裸鼠脾细胞尾静脉输注并于次日开始给予地塞米松Dex腹腔注射(10 mg/kg/day),共7天,给药结束后行皮肤移植;对照组:受者移植前8天给予Balb/c裸鼠脾细胞尾静脉输注后,未进行任何处理即行皮肤移植。流式细胞术(FACS)分别检测地塞米松处理7天后以及移植后7天受者脾淋巴细胞CD4~+CD25~+调节性T细胞比例和凋亡细胞比例的改变,并采用HE染色组织病理学观察术后7天移植皮片的病理表现,以及观测移植皮片存活时间。2.体外实验:单向混合淋巴细胞培养(MLC)。实验组:丝裂霉素C处理后失去增殖活性的Balb/c (H-2d)小鼠脾细胞作为刺激细胞,体内实验中的实验组Dex处理7天和皮肤移植后7天的脾细胞分别作为反应细胞;对照组:丝裂霉素C处理后失去增殖活性的Balb/c(H-2d)小鼠脾细胞作为刺激细胞,正常C57BL/6小鼠(H-2b)的脾细胞作为反应细胞,体外混合培养48小时后,采用AlamarBlue染色法检测同种抗原刺激后脾细胞增殖活性变化。结果:预致敏并给予7天地塞米松后,经过48h单向混合淋巴细胞培养,实验组反应细胞对Balb/c同种抗原的增殖率为18.52±2.81%,显著低于对照组的29.18±5.53%(P<0.05)。实验组反应细胞中CD4+CD25+Treg比例为3.62±0.66%,显著高于对照组的2.22±0.29%(P <0.05);凋亡细胞比例为38.29±1.73%,显著高于对照组的23.18±1.32%(P <0.05)。移植后7天体外混合淋巴细胞培养后实验组受鼠脾细胞对Balb/c同种抗原的增殖率为25.07±0.62%,显著低于对照组的34.29±0.94%(P <0.05)。移植皮肤发生排斥反应后,实验组受鼠脾淋巴细胞中CD4+CD25+Treg的比例为3.39±0.21%,高于对照组的1.57±0.3%(P<0.05);凋亡细胞的比例为17.43±2.26%,高于对照组的13.11±2.09%(P <0.05)。取移植皮片组织病理学检测显示,实验组移植皮片淋巴细胞浸润程度明显轻于对照组,组织结构基本完整。本方案处理后移植皮片平均存活时间(MST)为19.27±1.68天,显著长于对照组的11.56±1.19天(n=6),(P <0.05)。结论:供者脾细胞特异性输注联合地塞米松通过清除同种反应性T细胞克隆,诱导受者脾淋巴细胞中凋亡细胞的比例,并上调CD4+CD25+调节性T细胞的比例,降低受者同种抗原的应答能力,从而显著延长同种皮肤移植模型中移植物的存活时间。