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目的：在畜牧业发达的内蒙古通辽地区，奶牛乳腺炎不仅严重威胁着奶牛的健康，而且为乳制品的安全性带来了潜在的风险。所以，研制出安全、高效的疫苗来防治奶牛乳腺炎迫在眉睫。本实验通过克隆奶牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿骨架蛋白BP亚基基因，获得其抗原表位基因编码蛋白序列，经构建重组表达载体，使其在大肠杆菌中高效表达，并对表达蛋白的亚基抗原性进行研究，为进一步研究奶牛乳腺炎无乳链球菌重组基因工程疫苗候选亚单位抗原提供了实验基础。 方法：通过DNAMAN生物信息软件分析Genbank中已有的无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a的BP亚基抗原优势性表位基因序列设计1对克隆引物，以通辽地区无乳链球菌临床分离株总DNA为模板，克隆BP基因，测序后对其基因序列进行分析与比对。构建重组表达质粒pET-30a(+)-BP，转化至E.coli/BL21（DE3）中工程菌，经IPTG诱导表达后，进行SDS-PAGE电泳，经Western-blot对进行免疫反应原性鉴定。利用Ni2+层析柱对表达蛋白进行亲和层析纯化，经弗氏佐剂处理定期免疫家兔，制备兔抗BP抗体，建立检测免疫抗体滴度的间接ELISA方法。 结果：克隆测序结果显示，成功克隆奶牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿骨架蛋白BP基因，序列长609bp，共编码203个氨基酸残基。成功构建了原核表达重组质粒pET-30a(+)-BP，在大肠杆菌中获得高效的可溶性原核表达，重组蛋白的相对分子质量为33Ku，在裂解菌体的上清中可溶性蛋白表达量达到54.2％，纯化蛋白含量达到1.7mg/mL。经Western-blot结果显示，BP亚基重组蛋白具有良好的反应原性，经间接ELISA检测免疫抗体滴度，第三次免疫后，56d的免疫抗体滴度高达1:4800，70d后依然达到较高的抗体滴度水平。 结论：研究结果表明，牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿BP亚基的抗原表位序列编码蛋白具有较好的抗原性，为进一步研究无乳链球菌感染机制和制备新型生物制剂提供理论依据。