衣原体(Chlamydia spp.)是一种严格胞内寄生的原核细胞微生物,革兰氏染色阴性,镜下外形呈现球状;其能够在鸡胚和易感的细胞系中良好地生长、繁殖,生活史分为原体和始体两个时期。衣原体不仅在自然界广泛存在,在美洲、欧洲、亚洲、非洲和大洋洲均有感染的报道。它的宿主也十分多样,可感染多种禽类和哺乳动物。衣原体门包括1个衣原体纲(Chlamydiia),1个衣原体目(Chlamydiales),衣原体目下设8个科,其中衣原体科(Chlamydiaceae)是与引起人和动物患病的相关衣原体种,目前总共有12个衣原体种:沙眼衣原体(C.trachomatis)、肺炎衣原体(C.pneumonia)、流产衣原体(C.abortus)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)、猪衣原体(C.suis)、家畜衣原体(C.pecorum).猫衣原体(C.felis)、鼠衣原体(C.muridarum)、豚鼠衣原体(C.caviae)、朱鹭衣原体(C.ibidis)、鸟衣原体(C.avium)和家禽衣原体(C.gallinacea)。鹦鹉热衣原体一直被认为是引起禽衣原体病的唯一病原,直到近几年C.galliacea和鸟衣原体在欧洲、中国等地区被发现。根据当前的调查发现,鸟衣原体在鸽子中检出较多,而C.gallinacea在鸡、火鸡中广泛流行。目前C.gallinace 在家禽中的流行率甚至超过了鹦鹉热衣原体,关于C.galliacea的报道主要是不同地区的流行状况、宿主专嗜性和基因组学研究,但其传播方式仍然未知。为了对C.gallinace 在鸡群中的水平传播方式进行探究,本研究利用禽用隔离器建立了水平传播实验模型,使用通气管连接排气口和进气口,让SPF鸡通过粪口途径和空气吸入途径分别接触经阳性鸡群排泄物污染的食物、饮水和空气。Ⅰ号隔离器中的SPF鸡可以直接接触人工接种的带毒鸡群及其粪便,Ⅱ号隔离器为对照组,Ⅲ号隔离器中SPF鸡吸入的气体全部来自于人工接种的带毒鸡群所在的隔离器。实验结果表明,第15天时粪口途径感染组中所有的SPF鸡都感染了 C.gallinacea,而空气传播组在第5、10、15、20、25天所采集的喉拭子与泄殖腔拭子样品检测C.galliacea均为阴性,对照组中两种拭子样品检测也均为阴性,因此证明C.galliacea能够通过粪口途径传播,但不能够通过空气传播。随后,分别从人工感染组、直接接触组和空气传播组中随机选取5只鸡检测脏器中C.gallinacea分布。结果显示空气传播组中所有脏器均为阴性,而人工感染组和直接接触组中脏器C.gallinacea阳性个数如下:心脏(2/10)、肺脏(2/10)、脾脏(3/10)、肾脏(1/10)、腺胃(3/10)、十二指肠(7/10)、直肠(10/10)、泄殖腔(10/10)、卵巢(1/10),其中十二指肠、直肠、泄殖腔C.gallinacea的阳性率和平均基因拷贝数均高于其他脏器。为了对C.gallinacea在鸡群中的垂直传播方式进行研究,本研究采集了江苏省邵伯镇某种鸡场100只种母鸡泄殖腔拭子样品、28只种公鸡泄殖腔拭子及精液样品;采集其所产种蛋的蛋壳拭子样品294份,其中128枚种蛋(18枚为孵化9日后经照蛋发现未受精蛋)收集蛋清、蛋黄样品;55枚种蛋经孵化得到19日龄的鸡胚采集心、肝、脾、肺、肾、肠等脏器样品,应用基于衣原体23S rRNA基因的FRET-qPCR方法进行C.gallinacea的检测。研究表明,在该种鸡场种母鸡泄殖腔拭子样品的阳性率为75%(75/100),而公鸡精液中样品的阳性率为0%(0/28),公鸡泄殖腔拭子样品阳性率为0%(0/28)。294枚种蛋样品中,蛋壳拭子的阳性率为97.62%(287/294),蛋清阳性率为7%(9/128),蛋黄阳性率为5.4%(7/128),并且所有蛋黄样品检测为阳性的种蛋,其蛋清也是阳性。所检鸡胚脏器中,心脏的阳性率为9%(5/55),肝脏为5.5%(3/55),脾脏为12.7%(7/55),肺脏为11%(6/55),肾脏为 14.5%(8/55),肠为 7.3%(4/55)。本研究是首次对C.gallinacea传播方式进行的探索,通过建立水平传播实验模型,验证了粪口途径为Cgalinacea在鸡群中水平传播的主要方式。同时,通过检测种鸡场中种鸡喉拭子、泄殖腔拭子、种蛋、鸡胚脏器等样品,提示C.gallinacea可能通过蛋壳渗透等方式在亲代和子代之间发生垂直传播。