【摘 要】
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硫化氢（H2S）是一种重要的气体信号分子,在动植物体内可以内源性地产生,调控植物的生长发育,提高植物抗逆能力。酶活性测定表明,L-半胱氨酸脱巯基酶（L-CDs）LCD和DES主要负责植物内
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硫化氢（H2S）是一种重要的气体信号分子,在动植物体内可以内源性地产生,调控植物的生长发育,提高植物抗逆能力。酶活性测定表明,L-半胱氨酸脱巯基酶（L-CDs）LCD和DES主要负责植物内源H2S的产生。黄瓜是重要的蔬菜作物,维生素含量丰富,黄瓜L-CDs的确定,有助于了解黄瓜抗逆机制,对黄瓜抗逆品种的选育具有重要指导意义。本论文研究黄瓜内源H2S信号对高温（37℃）、低温（4℃）、渗透胁迫（PEG8000）和弱光（遮光70%）环境的响应,以及黄瓜L-CDs的鉴定,结果如下:（1）黄瓜在4℃或PEG8000处理2-8小时,或在37℃、或弱光下处理4-8小时,H2S含量均高于对照;PEG8000处理2小时,或37℃、或弱光处理、或4℃处理4小时,H2S的产生速率增加。（2）CsaLCD基因响应高温、渗透胁迫和弱光条件,37℃处理2-8小时、PEG8000处理4-8小时、或弱光处理2小时可诱导其mRNA水平升高;CsaDES基因响应高温和低温胁迫,4℃处理2小时、或37℃处理4小时,CsaDES2的mRNA水平升高。（3）通过序列比对获得三个L-CDs基因,CsaLCD、CsaDES1和CsaDES2。PCR成功扩增CsaLCD（Csa2P034800.1）和CsaDES2（Csa1P574810.1）的CDS序列;重组蛋白His-CsaLCD和His-CsaDES2都表现出明显的L-CDs活性。（4）将具有35S启动子的CsaLCD或CsaDES2的CDS转化拟南芥lcd/des1突变体,转基因植株的H2S产生速率得到恢复?并且迅速恢复了突变体气孔对PEG8000处理不敏感的表型。本研究表明,CsaLCD和CsaDES2是黄瓜的内源H2S产生酶,两者对逆境胁迫的反应存在部分差异。
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