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目的宫颈癌(Cervical cancer)是世界范围内女性肿瘤诊出率较高的疾病,死亡率居于第4位。尽管预防性的HPV疫苗和传统的子宫颈涂片检查能够降低宫颈癌的发生率和死亡率,但由于晚期诊断和常规治疗抵抗的发生,每年仍有大量女性死于该病。因此,确定能够预测临床结果并设计有力治疗方案的分子标志物至关重要。MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,它能够调节基因表达,涉及到多种细胞通路的调节,包括癌前病变进展至侵袭和转移的过程。研究表明,miRNA在正常代谢和细胞内环境稳态中发挥重要功能,因此,这些分子的功能失调与人类疾病密切相关。β-1,4-多聚乙酰氨基乳糖酶III(B4GALT3)属于B4GALT家族,它能催化多聚N-乙酰氨基乳糖的生成并与肿瘤的发生有关。然而,B4GALT3的上调机制以及它在宫颈癌中的作用尚不清楚。本研究旨在探究B4GALT3对宫颈癌细胞恶性行为的影响及其上下游调控的机制从而阐明B4GALT3在宫颈癌发生中的作用,为寻找治疗宫颈癌的分子标记物提供理论基础。方法首先运用RT-qPCR技术检测了宫颈癌组织和邻近癌旁组织中B4GALT3的表达量。其次,运用划痕实验、transwell迁移和侵袭实验、Western blot实验检测了B4GALT3对宫颈癌细胞迁移、侵袭能力以及EMT进程的影响。接着我们运用生物信息学方法预测了能够靶定B4GALT3的miRNA,并通过RT-qPCR实验、Western blot实验检测了miR-27a异常表达对B4GALT3 mRNA水平和蛋白水平的影响,同时用EGFP和luciferase荧光报告载体系统进一步验证二者的直接靶定关系。随后我们通过mRNA和蛋白降解实验检测了miR-27a上调B4GALT3的机制,同时我们检测了miR-27a对宫颈癌细胞恶性表型的影响、敲降B4GALT3对miR-27a引起的恶性表型的挽救作用以及封闭miR-27a对B4GALT3致癌活性的影响。最后,我们运用蛋白降解实验检测了B4GALT3对β1-integrin蛋白稳定性的影响。结果与邻近正常宫颈组织相比,B4GALT3在宫颈癌组织中高表达。B4GALT3高表达能够促进宫颈癌细胞系HeLa和C33A的迁移、侵袭和EMT进程。为探索B4GALT3的失调机制,我们预测了其上游的miRNA。EGFP和p GL3-promoter报告系统表明:miR-27a结合B4GALT3的3’UTR区并促进它的表达。RT-q PCR实验表明,miR-27a在宫颈癌组织当中也高表达并与B4GALT3的表达量呈正相关。miR-27a并不影响B4GALT3 m RNA和蛋白的稳定性。miR-27a高表达引起宫颈癌细胞系He La和C33A恶性行为的发生。而封闭miR-27a能够抑制这些恶性行为的发生。而且,敲降B4GALT3能够削弱miR-27a的致癌活性,封闭miR-27a能够削弱B4GALT3的致癌活性。这表明,miR-27a通过上调B4GALT3进而促进宫颈癌细胞的恶性行为。此外,我们还发现B4GALT3能够明显促进β1整合素(β1-integrin)的稳定性,并通过该通路影响B4GALT3对宫颈癌细胞的迁移和侵袭作用。综上所述,B4GALT3受miR-27a上调并通过β1-integrin通路促进宫颈癌细胞的恶性行为,有可能成为宫颈癌治疗的潜在标志物。结论B4GALT3受miR-27a上调并通过增强β1-integrin的蛋白稳定性促进宫颈癌细胞的迁移和侵袭。