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目的:姜黄素是从姜黄根茎中提取的有效活性成分,是一种应用前景广泛的天然抗肿瘤药物。但姜黄素水溶性差,生物利用度低,这就大大限制了姜黄素的临床推广。本研究制备了中空介孔二氧化硅纳米粒子,负载姜黄素,得到中空介孔二氧化硅-姜黄素纳米制剂,通过质量评价和药物释放研究后,以肝癌SMMC-7721细胞和Hep G2细胞为研究对象,探索:1.中空介孔二氧化硅-姜黄素纳米制剂对肝癌细胞增殖和凋亡的影响;2.中空介孔二氧化硅-姜黄素纳米制剂是否激活肝癌细胞自噬。这不仅能解决姜黄素生物利用度低的问题,并且可明确中空介孔二氧化硅-姜黄素纳米制剂抗肝癌的部分机理,为肝癌的临床应用提供理论基础。方法:1.乳液聚合法制备阳离子聚苯乙烯模板(CPS),以CPS为模板,加入Na2Si O3·9H2O,制备二氧化硅纳米粒子,经高温分层煅烧,得到中空介孔二氧化硅纳米粒子(HMS)。扫描电镜(SEM)对CPS和HMS进行表征。2.HMS和姜黄素以一定比例混合,机械搅拌后得到中空介孔二氧化硅-姜黄素纳米粒子(HMS-CUR),用透射电镜(TEM)进行表征,傅里叶红外光谱(FT-IR)进行质量评价,紫外分光光度计进行体外释放研究。3.设立空白对照、单纯HMS组、游离姜黄素组(浓度:5μM)、HMS-CUR组(实际姜黄素含量:3.5μM),分别处理肝癌细胞,采用CCK-8和平板克隆形成试验检测药物对肝癌细胞的增殖抑制作用,并且用Western Blot半定量检测药物处理后细胞增殖相关蛋白的表达。4.Hoechst 33342染色定性观察药物处理后细胞凋亡情况,Annexin V/PI检测细胞凋亡率,药物处理后细胞凋亡相关蛋白的表达用Western Blot半定量检测。5.Western Blot半定量检测自噬相关蛋白表达。结果:1.SEM结果显示CPS和HMS大小均一,粒径在50-100nm之间。2.TEM和FT-IR证实,姜黄素负载在HMS上。UV-Vis分析HMS-CUR在乙醇中迅速释放,在DMEM、10%FBS-DMEM中缓慢释放。3.CCK-8和平板克隆形成试验结果表明:HMS-CUR对肝癌细胞有增殖抑制作用(p<0.05),且具缓释效应。HMS-CUR能下调增殖细胞核抗原(PCNA)的表达(p<0.05)。4.Hoechst 33342染色和Annexin V/PI结果显示,HMS-CUR能诱导肝癌细胞凋亡(p<0.05),且可上调凋亡相关蛋白(Cleaved-PARP,Cleaved-Caspase3)的表达(p<0.05)。5.HMS-CUR激活了肝癌细胞的自噬,Western Blot结果显示HMS-CUR处理肝癌细胞后,LC3-I向LC3-II的转化率增加,Beclin1表达上调(p<0.05)。此外,在SMMC-7721细胞中,P62/SQSTM1表达下调(p<0.05),但在Hep G2细胞中却呈相反的上升趋势(p<0.05)。结论:HMS作为一种无毒,生物相容性良好的新型载药体系,可有效解决姜黄素水溶性差的难题。与游离姜黄素相比,HMS-CUR能显著抑制肝癌细胞增殖,诱导凋亡,激活自噬。且HMS-CUR对肝癌细胞的作用具有缓释效应。