药物性肝损伤指在治疗疾病过程中应用药物时,因药物本身和/或其代谢物具有细胞毒性引起的肝脏损伤。对乙酰氨基酚（Acetaminophen,APAP）是目前广泛使用的解热镇痛药物,在治疗剂量以下使用时是安全的。但是单次过量或长期大量服用APAP则会产生肝脏毒性,过量服用APAP是目前导致药物性肝损伤或急性肝衰竭的主要因素。正常情况下,摄入的APAP中90%会通过葡萄糖醛酸化和硫酸化反应无毒性降解,约5%会被肝脏中细胞色素P450系统氧化代谢为强亲电性的N-乙酰-对苯醌亚胺（Nacetyl-p-benzoquinone imine,NAPQI）。NAPQI由肝细胞中的谷胱甘肽（glutathione,GSH）降解,但过量服用APAP产生大量的NAPQI会迅速耗竭肝脏中的GSH。GSH是维持细胞氧还平衡的重要硫醇,缺乏GSH时,NAPQI会直接与细胞内的大分子共价结合形成缀合物,并损伤以线粒体为主的细胞器;同时线粒体内容物流出和细胞代谢产生的氧自由基也会因缺少GSH降解而导致严重的氧化应激,最终导致细胞死亡。考虑到GSH在代谢NAPQI和清除自由基中的重要作用,提高细胞中GSH含量是治疗APAP中毒的有效措施。由于绝大多数哺乳动物细胞都无法直接摄取完整的GSH,并且GSH在消化道和血液中会被迅速降解,限制了外源性GSH的药用。N-乙酰半胱氨酸（N-Acetyl-L-cysteine,NAC）是目前唯一被批准用作APAP解毒剂的药物,通过为细胞提供从头合成GSH的限制性底物半胱氨酸,再经两步酶促反应合成GSH来恢复细胞的GSH含量。但NAC存在使用时间限制、治疗效果有限和具有令人不适的副作用等局限,研发比NAC更高效和更安全的替代药物在减轻患者痛苦和挽救患者生命方面具有重要现实意义。γ-谷氨酰半胱氨酸（γ-glutamylcysteine,γ-GC）是合成GSH的直接前体,可经一步酶促反应合成GSH。据报道,γ-GC具有抗氧化和抗炎作用。相比NAC,γ-GC具有合成GSH效率更高和无毒副作用等特点。本论文探讨了γ-GC在APAP过量所致小鼠肝损伤模型中的作用。我们通过腹腔注射400mg/kg的APAP诱导小鼠急性肝损伤模型,实验结果显示,腹腔注射APAP90分钟后肝脏GSH减少超过90%,12小时后,小鼠肝脏静脉周围出现大面积坏死和细胞凋亡,血清AST/ALT、LDH、HMGB-1和IL-1β水平升高,肝脏中GSH持续大幅减少,ROS及氧化应激所致脂质过氧化产物（MDA和4-HNE）和蛋白质硝化产物（3-NT）增加。若摄入APAP前预先连续七天给小鼠口服γ-GC（510或1020mg/kg/day）,H&E染色显示,APAP所致肝脏组织坏死显著减少;血清学检测显示,APAP所致血清AST、ALT和LDH的升高亦被抑制;ELISA检测显示,APAP所致血中促炎因子HMGB-1和IL-1β水平升高显著被抑制;TUNEL检测显示,APAP所致肝脏细胞凋亡显著减少。作为GSH前体,γ-GC可增加细胞内GSH水平,我们的研究结果显示,预先给小鼠口服γ-GC抑制了APAP诱导的肝脏GSH降低,并减少ROS的产生,降低肝脏中MDA、4-HNE和3-NT水平。若摄入APAP 2小时后给小鼠口服γ-GC（1020mg/kg）,γ-GC能够在2小时内将肝脏中GSH含量恢复至接近正常水平,并逆转APAP所致肝脏组织坏死和细胞凋亡,降低APAP所致血清AST、ALT、LDH、HMGB-1和IL-1β水平升高,能够显著提高肝内GSH水平,并减少ROS的产生,降低肝脏中MDA、4-HNE和3-NT水平。此外,γ-GC也可以加快肝脏损伤后的再生修复进程,但作用机制有待进一步研究。总之,我们证实口服γ-GC可以逆转APAP所致小鼠急性肝损伤。γ-GC通过直接合成GSH和降低ROS产生来减少APAP所致肝脏组织坏死和肝细胞凋亡,并降低炎症反应和氧化应激损伤,并能加快小鼠肝脏损伤后的再生修复进程。我们的研究显示,在γ-GC在减少肝脏细胞凋亡和促进肝损伤后再生修复方面优于NAC,再考虑到γ-GC在合成GSH的效率和安全性方面的优势,我们认为γ-GC具有替代NAC作为APAP解毒药物的潜力。