植物内生菌与植物长期共生,可产生多种与宿主植物类似活性化合物,是目前寻找天然活性成分的重要资源。本实验以药用植物茵陈为目标,对其内生细菌进行分离纯化鉴定,从中筛选活性菌株,对发酵产物相关性质进行研究,分离纯化出次级代谢产物,并对产物进行活性测试。具体研究内容及结果如下:以茵陈为研究对象,采用组织分离法,经多次分离纯化从茵陈中筛选出52株内生细菌,通过形态学观察与16Sr DNA技术相结合的方法鉴定内生细菌,经鉴定含29株枯草芽孢杆菌（B.subtilis）,7株蜡样芽孢杆菌（B.cereus）,6株巨大芽孢杆菌（B.megaterium）,4株地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）,2株短小芽孢杆菌（B.pumilus）,1株简单芽孢杆菌（B.simplex）,1株病研所芽孢杆菌（B.idriensis）,1株醋酸钙不动杆菌（A.calcoaceticus）,1株屎肠球菌（E.faecium）。采用96孔板法及牛津杯法相结合的双重抑菌活性检测的筛选模式,从分离到的内生细菌中筛选出一株醋酸钙不动杆菌KMB32具较好的抗菌活性,对菌株KMB32发酵产物性质进行探究,最终确定发酵产物可耐受高温,但不耐受极端p H环境,在发酵时间48 h的条件下发酵产物抑菌活性最佳,且发酵产物中发挥活性成分非蛋白类物质。选取3种极性溶剂对发酵产物萃取,发现乙酸乙酯相粗提物的抑菌活性最强,对不同粗提物间的抗氧化性对比发现,乙酸乙酯相的抗氧化性均高于石油醚相、氯仿相的抗氧化性。因此选取乙酸乙酯作为合适的萃取剂。经前期条件摸索后,对活性菌株大批量发酵,采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析、制备型HPLC结合薄层层析分析,共分离到5个单体化合物,对单体化合物进行纯度检测后,运用现代波谱技术(ESI-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR)对其结构进行分析,初步鉴定出1个化合物为邻苯二甲酸二丁酯,时间关系其余化合物的鉴定在后续研究中完成。选取4种指示菌,对纯化的单体化合物1-5进行抑菌活性测定,采用MIC法,5个化合物对指示菌有不同程度的抑制效果。采用MTT法,选取MCF-7细胞作为模型,对单体化合物1-5进行抗肿瘤活性测定,测定它们的IC50值,结果显示5个化合物具有不同程度的抗肿瘤活性,其中化合物1、4、5的抗肿瘤活性较强。总的来说,在对植物内生菌的次级代谢产物的研究过程中,我们发现在药用植物中存在种类繁多的内生菌,其中不乏活性菌株,通过对活性菌株的次级代谢产物的探索,可以为新型高效药物的研制提供参考。