B细胞非霍奇金淋巴瘤患者p57KIP2基因甲基化状态及临床意义的研究

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目的:探讨B细胞非霍奇金淋巴瘤(B cell non-Hodgkin’s Lymphoma,B-NHL)患者p57KIP2基因甲基化状态及其临床意义,为寻找新的治疗靶点奠定基础。方法:1.一般资料2012年1月到2016年5月就诊于山西大医院肿瘤内三科的36例非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s Lymphoma,NHL)患者,男性20例,女性16例,男:女为1:0.8,年龄19-74岁,中位年龄51岁。所有患者均经淋巴结活检,有明确的病理形态学、免疫组织化学诊断,诊断参照2008版淋巴造血组织肿瘤WHO分类标准。其中B-NHL32例,T-细胞非霍奇金淋巴瘤(T cell non-Hodgkin’s Lymphoma,T-NHL)4例。B-NHL患者中弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B celllymphoma,DLBCL)21例,套细胞淋巴瘤(Mantle Cell Lymphoma,MCL)6例,边缘区淋巴瘤(Marginal Zone Lymphoma,MZL)4例,小淋巴细胞淋巴瘤(Small Lymphocytic Lymphoma,SLL)1例。T-NHL患者中T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(T Lymphoblastic Lymphoma/Leukemia,TLBL)2例,血管免疫母细胞淋巴瘤(Angioimmunoblastic T Lymphoma,AITL)2例。以10例淋巴结炎组织标本作为对照组。治疗方案及疗效评估:DLBCL治疗参照《中国弥漫大B细胞淋巴瘤诊断与治疗指南(2013年版)》,采用类R-CHOP(利妥昔单抗、环磷酰胺、蒽环类、长春新碱和地塞米松)方案治疗;MCL、MZL、AITL参照NCCN临床实践指南,MCL予HyperCAVD(环磷酰胺、长春新碱、阿霉素、泼尼松组成的A方案和甲氨蝶呤、阿糖胞苷构成的B方案交替)为主方案治疗,MZL、AITL采用类CHOP方案治疗,T-LBL采用BFM90方案。疗效评估参照WHO淋巴瘤疗效评价标准。随访:所有患者随访至2017年1月1日,14例死亡,1例失访。2.标本采集收集治疗前活检的新鲜无菌淋巴结组织标本,-80℃冻存备用。3.研究方法用组织dna提取试剂盒提取患者淋巴结组织中dna,亚硫酸氢钠处理dna后,应用甲基化特异性pcr(methylationspecificpcr,msp)结合变性高效液相色谱(denaturedhighperformanceliquidchromatography,dhplc)技术,检测p57kip2基因甲基化。4.统计处理应用spss22.0软件进行数据统计学处理:用独立样本的mann-whitneyu检验比较病例组和对照组间组织标本中p57kip2基因甲基化状态;fisher卡方检验分析组织中p57kip2基因甲基化状态与临床表现间的关系;采用kaplan-meier生存分析法分析b-nhl患者的生存情况。p<0.05差异有统计学意义。结果:1.nhl患者瘤组织p57kip2甲基化率为27.8%(10/36),10例淋巴结炎患者的淋巴结组织无p57kip2基因甲基化;nhl组织中p57kip2甲基化率高于淋巴结炎患者淋巴结组织中p57kip2甲基化率。b-nhl患者瘤组织中p57kip2甲基化率为31.2%(10/32),t-nhl患者瘤组织未见p57kip2基因甲基化;b-nhl患者瘤组织中p57kip2甲基化率高于t-nhl患者瘤组织中p57kip2甲基化率。dlbcl、mcl、mzl患者瘤组织中p57kip2基因甲基化分别为33.3%(7/21)、33.3%(2/6)、25%(1/4),sll患者瘤组织未见p57kip2基因甲基化。2.乳酸脱氢酶(ldh)高水平组中p57kip2基因甲基化(8/15)高于ldh正常组(2/17),差别有统计学意义(p=0.021,p<0.05)。p57kip2基因甲基化与患者的年龄、性别、淋巴结外累及、b症状、骨髓有无累及、临床分期、分型、ipi评分、血清β2-mg水平、淋巴细胞数、hb水平、plt数、增殖指数(ki-67)、疗效等均无明显相关,差别无统计学意义(p>0.05)。3.p57kip2基因甲基化与患者的总生存期(os)无明显相关,差别无统计学意义(p=0.905)。结论:1.nhl瘤组织p57kip2基因甲基化率较高,p57kip2基因甲基化在淋巴瘤组织有一定特异性;2.b-nhl患者ldh高水平组中p57kip2基因甲基化较ldh正常组高,p57kip2基因甲基化状态可能与b-nhl患者肿瘤负荷高相关;3.b-nhl瘤组织p57kip2基因甲基化率高于T-NHL瘤组织p57KIP2基因甲基化率。
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