银环蛇咬伤中毒后兔血清和肌肉组织乙酰胆碱浓度变化及抗银环蛇毒血清作用时效性的研究

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yunzh
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背景:毒蛇咬伤是一个严重的全球性常见公共卫生问题,除了高发病率和死亡率之外,毒蛇咬伤还会给受害者和社会带来沉重的经济负担。我国境内剧毒类毒蛇有十种,被俗称为“中国十大毒蛇”。银环蛇属神经毒类毒蛇的一种,被其咬伤后,伤口局部症状轻微,但数小时内患者便出现全身中毒反应,主要表现为呼吸肌麻痹,严重者可导致呼吸骤停,死亡率极高,是急诊科常见的一种急危重症。银环蛇咬伤中毒后,治疗首选及早注射抗银环蛇毒血清。目前国内外尚无符合银环蛇咬伤中毒临床特点的动物模型。因此,通过模拟临床银环蛇咬伤案例,初步构建较符合临床表现的银环蛇咬伤中毒兔模型,并在此模型的基础上进一步研究抗银环蛇毒血清作用的时效性,对完善毒蛇咬伤抢救措施、降低死亡率、减少住院时间、改善预后以及提高神经毒类毒蛇咬伤的救治水平提供帮助。目的:本研究旨在初步构建较符合临床表现的银环蛇咬伤中毒兔模型并在此模型的基础上检测中毒后兔血清和眼睑肌肉中乙酰胆碱浓度的变化情况,进一步探究抗银环蛇毒血清作用的时效性。方法:选取新西兰大白兔,依据人兔等效剂量换算表和银环蛇一次咬物排毒量表,配制成不同浓度剂量的银环蛇蛇毒溶液,完全模拟临床银环蛇咬伤的实况,将新西兰兔随机分为12组,每组分别注射不同浓度剂量的银环蛇蛇毒溶液,在注毒完成后统计分析各组实验兔子出现呼吸暂停的时间,并重复实验同时缩小注毒范围,最终筛选出符合临床表现建模成功的目标蛇毒注射量;造模成功后,将新西兰兔按咬伤中毒后0分钟、1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5分钟及10分钟和30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时及6小时随机分为14组,同时取各组对应时间点的血液和眼睑肌肉组织样本,通过ELISA法检测各组样本中游离乙酰胆碱的含量,探究银环蛇咬伤中毒后不同时间点临床特点和乙酰胆碱浓度改变是否相符;应用银环蛇咬伤中毒兔子模型,将实验兔按抗银环蛇毒血清的不同注射时间随机分为0分钟组、10分钟组、30分钟组、1小时组、2小时组、3小时组、4小时组、5小时组、6小时组、空白对照组以及实验对照组共11组,分别由兔耳缘静脉注射抗银环蛇毒血清,比较各组的临床表现、生存情况,探究抗银环蛇毒血清作用的时效性。结果:1、原液的1/12倍蛇毒含量组(0.0179 mg/kg)的兔子平均死亡时间5.92±0.22h与原液的1/12.5倍蛇毒含量(0.0172 mg/kg)的兔平均死亡时间6.51±0.23h相比较,差异有统计学意义,最终确定初步构建较符合临床上银环蛇咬伤中毒特点兔模型的目标注射剂量为以0.0179 mg/kg的银环蛇蛇毒干粉和0.6444 ul/kg H2O混合溶液。2、成功注射目标剂量的银环蛇蛇毒后,3分钟的时候兔子血清游离乙酰胆碱浓度开始下降;3小时的时候眼睑肌肉组织中游离乙酰胆碱浓度开始升高。3、成功注射目标剂量的银环蛇蛇毒后,分别对各组注射抗银环蛇毒血清,空白对照组、立刻组、10分钟组、30分钟组、1小时组和2小时组均存活;3小时组、4小时组、5小时组、6小时组以及实验对照组均未存活。结论:1、以0.0179 mg/kg的银环蛇蛇毒干粉和0.6444 ul/kg H2O混合溶液可初步构建符合银环蛇咬伤中毒临床特点的兔模型。2、银环蛇咬伤中毒后病情进展迅速,银环蛇毒素3分钟即可进入血液系统引起中毒反应;3小时后银环蛇毒素与乙酰胆碱受体的结合达到饱和,导致游离的乙酰胆碱蓄积。3、银环蛇咬伤中毒后3小时内使用抗银环蛇毒血清疗效比较肯定。
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