胆囊切除术后肠粘膜组织中5-HT变化的实验研究

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目的:胆囊切除是胆囊结石、胆囊息肉等胆囊疾病安全而有效的治疗方法。随着医学技术的不断发展以及医学知识的普及,人们对胆囊切除术已不再陌生和恐惧。腹腔镜具有良好的微创手术效果,自1987年法国医生Mouret首创腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)以来,此项技术在全世界得到广泛推广,使得行胆囊切除的患者大幅度增加。但胆囊切除术后可能导致一系列胃肠道相关症状的问题,如患者大便性状和(或)大便习惯的改变,甚至出现腹泻、恶心、腹胀、上腹部不适等胃肠道功能异常的问题,这严重影响了患者的生活质量,其中胆囊切除术后腹泻的问题较为突出,已日益引起人们的关注。腹泻的病因包括高渗性腹泻、吸收不良性腹泻、分泌性腹泻、渗出性腹泻以及传染性腹泻,各种病因所引起的腹泻持续时间长短不尽相同,严重者影响患者的日常工作及生活,但关于胆囊切除术后腹泻病因的研究国内外很少报道,从分子免疫水平上的报道更是凤毛麟角。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是一种与胃肠道活动关系密切的脑肠肽,又称为血清素(serotonin),是一种广泛存在于中枢神经系统和消化系统并参与调节胃肠道运动和分泌的重要神经递质和旁分泌信号分子[1]。5-HT信号系统的异常可导致胃肠道动力失调、内脏高敏感(hypersensitivity)以及胃肠道分泌功能紊乱,这些异常因素与功能性便秘、肠易激综合症、功能性腹泻及功能性消化不良等胃肠道功能性疾病有着密切的关系[2]。本实验通过对豚鼠胆囊切除术后肠粘膜组织中5-HT的表达量是否发生变化的实验研究,来探讨胆囊切除术后肠道粘膜组织的病理生理变化及其临床意义,以期为胆囊切除术后相关并发症的治疗提供理论依据。方法:以豚鼠为研究对象,取清洁豚鼠40只,体重250-300g,随机分为假手术对照组(A组)、和胆囊切除组(B组)共2组,每组均为20只,A组仅行腹腔开关术,B组行胆囊切除手术,手术均在无菌条件下进行。3周后待动物伤口愈合,饮食正常后,禁食12h,自由饮水,腹腔注射麻醉,待麻醉满意后无菌打开动物腹腔,取小肠(距幽门30cm一块记为A1或B1,距回盲部20cm一块记为A2或B2)和结肠(距回盲部5cm一块记为A3或B3,距肛门20cm一块记为A4或B4)标本,各标本经修整后放入中性福尔马林溶液中进行固定,然后行免疫组织化学染色。用显微镜Olympus BX51在10×20倍600×800像素下采集免疫组化图片,应用麦克奥迪数码医学图像分析系统对所采集的图片进行图像分析,统计每张采集图像的阳性细胞个数、阳性目标总面积及阳性目标积分光密度。统计学方法:所得数据在SPSS13.0统计分析软件上进行分析,结果以均数±标准差(x±s)表示,组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:不同部位的肠道粘膜组织实验结果如下1距幽门30cm小肠粘膜组织实验结果:正常对照组(A1)阳性细胞个数为5.66±1.46,阳性目标总面积为1437.51±283.51,阳性目标积分光密度为796.94±107.45;实验组(B1)阳性细胞个数为6.55±1.71,阳性目标总面积为1419.61±280.41,阳性目标积分光密度为891.05±162.41。A1组和B1组间阳性细胞个数、阳性目标总面积及阳性目标积分光密度差别均无显著意义(P>0.05)。2距回盲部20cm小肠粘膜组织实验结果:正常对照组(A2)阳性细胞个数为4.54±0.99,阳性目标总面积为1420.37±232.21,阳性目标积分光密度为759.10±110.12;实验组(B2)阳性细胞个数为6.14±0.99,阳性目标总面积为1702.01±377.38,阳性目标积分光密度为996.28±239.25。A2组和B2组间阳性细胞个数、阳性目标总面积及阳性目标积分光密度差别均有显著意义(P<0.05)。3距回盲部5cm结肠粘膜组织实验结果:正常对照组(A3)阳性细胞个数为6.66±1.12,阳性目标总面积为2146.47±470.42,阳性目标积分光密度为1228.77±238.06;实验组(B3)阳性细胞个数为8.65±1.50,阳性目标总面积为2805.24±969.87,阳性目标积分光密度为1689.62±567.18。A3组和B3组间阳性细胞个数、阳性目标总面积及阳性目标积分光密度差别均有显著意义(P<0.05)。4距肛门20cm结肠粘膜组织实验结果:正常对照组(A4)阳性细胞个数为1.94±0.43,阳性目标总面积为853.44±158.85,阳性目标积分光密度为489.79±78.52;实验组(B4)阳性细胞个数为2.36±0.66,阳性目标总面积为997.45±165.60,阳性目标积分光密度为626.84±104.72。A4组和B4组间阳性细胞个数、阳性目标总面积及阳性目标积分光密度差别均有显著意义(P<0.05)。结论:胆囊切除术后距幽门30cm处的小肠粘膜组织中5-HT的含量无变化,距回盲部20cm处的小肠粘膜组织和距回盲部5cm、距肛门20cm处的结肠粘膜组织中5-HT的含量均有增加。胆囊切除术后部分患者出现的腹泻与肠道中5-HT增加有关。
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