裸燕麦酚类化合物对糖脂代谢及肠道菌群调控研究

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裸燕麦,又称“莜麦”,是中国种植范围最广的一种燕麦属植物,其含有的活性物质对改善机体糖脂代谢有一定的影响。本文以裸燕麦酚类化合物(OPC)为主要研究对象,研究了裸燕麦酚类化合物的纯化、分相萃取及组分分析,进一步探究其在体外及体内,作为益生元对糖脂代谢调控的作用,得到了以下主要结论:1.采用响应面法对裸燕麦酚类化合物的纯化工艺作优化,得到静态吸附-解吸最佳工艺参数为:吸附时间8.238 h,解吸时间4.265 h,料液比1:11.926 g/mL,乙醇体积分数90.368%。在此纯化工艺条件下裸燕麦酚类化合物的吸附量为33.85mg/g,解吸率为94.44%;凝胶层析法的结果表明,降解温度越低,降解时间越长,裸燕麦β-葡聚糖的Mw越小,当酶添加量为0.05%,水浴处理时间为1 h时,得到相对分子质量为6.8×10~4 Da的低聚β-葡聚糖(OBG)。2.将酚类化合物用有机溶剂萃取为乙酸乙酯相,正丁醇相和水相后,采用UPLC分析测各分相酚类化合物的组成。结合乙酸乙酯相组成丰富,总酚含量为363.65±1.42 mg GAE/g,高于其他分相样品,而水相酚类化合物中酚酸的种类和数量最少。阿魏酸、咖啡酸和对羟基苯甲酸是结合态酚类化合物中主要的三种酚酸类成分,芦丁和芹菜素是裸燕麦中的主要两种黄酮类成分。结合正丁醇相酚类化合物(IC50=98.39±0.89μg/mL)具有最强的DPPH·自由基清除能力,水相酚类化合物最弱。3.采用动力学法分析裸燕麦酚类化合物与消化相关酶(α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶)之间的互作关系及抗消化作用。半纯化的结合酚类化合物对α-葡萄糖苷酶为可逆的竞争性抑制,而有机萃取物相酚类化合物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶则具有混合抑制剂的特性。另外,正丁醇相裸燕麦酚类化合物在体外的淀粉水解度明显低于其他馏分。4.建立曲奇和糖-蛋白质模拟体系,探究裸燕麦酚类化合物提取物对荧光性AGEs的抑制时效和量效关系。裸燕麦酚类化合物在曲奇和模拟体系中均表现出较好的抗糖基化能力,对曲奇中AGEs生成的抑制效果最好;在BSA-Glu中,当质量浓度为400和500μg/mL时,乙酸乙酯相和正丁醇相酚类化合物对荧光性AGEs的抑制效果高于氨基胍;此外,在测定浓度范围内,木犀草素对BSA-Glu体系荧光性AGEs的抑制效果最好,咖啡酸对Fru-Cys和Fru-Lys体系荧光性AGEs的抑制效果最好。5.对人源化菌群肥胖模型小鼠进行为期八周的不同剂量裸燕麦酚类化合物及其与β-葡聚糖的复配物灌胃处理。结果发现,灌胃裸燕麦酚类化合物和β-葡聚糖能够控制高脂饮食引起的肥胖小鼠的体重增长和血糖水平,显著降低小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平,显著增加HDL-C水平(p<0.01),同时提高肝脏抗氧化应激能力,且呈剂量依赖性;显著减少脂质在肥胖小鼠肝脏组织的沉积,使机体肝脏脂质的代谢功能正常,降低高血脂症的风险;OPC和OBG还可以调节小鼠肠道微生物的多样性和结构,提高Bacteroidetes的相对丰度,降低Firmicutes的相对丰度,降低F/B的比值。
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