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[目的]急性髓系白血病(AML)是临床常见的一类急性白血病,治疗后复发率和死亡率居高不下。然而目前AML诊断及病情评估手段单一、缺乏标准化,已无法满足临床诊疗的需求。另外AML发病的调控机制仍未被完全阐明。本研究通过检测113例AML患者临床样本,发现lncRNA XLOC＿109948在患者中表达异常,并进一步探讨XLOC＿109948调控AML细胞增殖、凋亡以及自噬的分子机制,对诊断AML患者、评价疾病进程具有重要意义。[方 法]1.收集昆明医科大学第二附属医院血液内科门诊或住院部确诊为AML的113例患者的骨髓组织和静脉血,提取总RNA,采用RT-qPCR方式检测XLOC＿109948的表达量,并结合临床资料进行分析;2.体外培养OCI-AML3细胞株,慢病毒干扰及过表达XLOC＿109948,采用CCK-8、Annexin V/PI方法研究XLOC＿109948的表达对肿瘤细胞的生物学表型的影响;3.采用RT-qPCR及Western bolt技术检测干扰和过表达目的基因后自噬标志蛋白LC3II/I、p62,以及PI3K-Akt信号通路的相关蛋白表达水平变化。[结 果]1.RT-qPCR结果显示:AML和完全缓解的AML患者(AML-CR)骨髓及血清中XLOC＿109948表达量均高于健康体检人群(p<0.001)。当骨髓组织中XLOC＿109948表达升高,血清中XLOC＿109948表达也随之升高,同一患者的两种类型样本对疾病进展监测结果一致(r2=0.7585,p<0.001),说明血清样本在一定程度上可以代替骨髓组织样本。XLOC＿109948的表达水平在化疗缓解时明显下调,复发时明显上调,且均具有统计学意义(p<0.05)。根据ROC结果,XLOC＿109948的曲线下面积(AUC)为 0.898(p<0.001,95%CI:0.847～0.948),提示 XLOC＿109948分子有成为AML诊断新指标的潜能。另外,XLOC＿109948的表达与细胞遗传学临床病理参数显著相关(p<0.05),但与性别、年龄、WBC、Blast、FAB亚型等临床特征无相关性(p>0.05)。2.利用慢病毒在OCI-AML3细胞株中干扰和过表达XLOC＿109948后,CCK-8实验结果显示:干扰组相比对照组细胞增殖受到抑制,过表达组细胞增殖能力增加,24h、48h的OD450值差异具有统计学意义(p<0.001)。流式结果发现:干扰组相比对照组细胞凋亡比率增加(p<0.001),过表达组相比对照组细胞凋亡比率减少(pp<0.001)。RT-qPCR及western bolt结果显示:sh-XLOC＿109948组相比sh-NC组自噬标志蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ表达量下降(p<0.01),p62 蛋白表达量增加(p<0.001),pcDNA-XLOC＿109948 组相比 pcDNA-NC 组 LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量增加(p<0.001),p62蛋白表达量下降(p<0.001)。3.RT-qPCR及western bolt结果显示:干扰、过表达的实验组与对照组细胞相比,Akt与PI3K蛋白表达没有显著变化(p>0.05),而磷酸化的Akt与PI3K蛋白表达量产生明显变化:过表达实验组p-Akt(p<0.01)、p-PI3K蛋白(p<0.001)表达量均降低。[结 论]1.lncRNA XLOC＿109948是一个致癌基因,在AML患者中高表达,其表达量与疾病进程、AML细胞遗传学密切相关。2.随着AML恶性程度的进展,XLOC＿109948分子的异常表达在骨髓组织和血液中同时显现,骨髓组织中XLOC＿109948表达量与血清中XLOC＿109948表达量成正相关。血清样本在临床诊疗的评价应用中优于骨髓组织样本,同时也提示采集血清样本可以代替有创的骨髓组织采样,减少患者的痛苦。3.ROC值提示XLOC＿109948有望成为AML的一个潜在诊断指标,但是其具体的诊断价值还需要纳入更多临床样本进一步研究。4.lncRNA XLOC＿109948促进OCI-AML3细胞的增殖、自噬,抑制细胞凋亡。5.lncRNA XLOC＿109948抑制OCI-AML3细胞中PI3K-Akt通路的磷酸化水平,起到致癌作用。