中药人参黄芪复方联合5-FU对人胃癌MGC-803细胞生物学行为的影响

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目的1.探讨中药人参黄芪复方与5-FU单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞的生长作用作用;2.探讨中药人参黄芪复方与5-FU单用及联合应用诱导胃癌MGC-803细胞凋亡和对其细胞周期的影响;3.探讨中药人参黄芪复方与5-FU单用及联合应用抑制胃癌MGC-803细胞迁移能力的作用。旨在为临床上联合应用复方中药和5-FU治疗胃癌提供实验依据。方法1.利用基于酶标仪的MTT法测定不同浓度的中药人参黄芪复方(7、14、70、140mg/ml)与不同浓度5-FU(0.0125、0.025、0.05、0.1mg/ml)单用及联合应用对体外培养胃癌MGC-803细胞生长与增殖的影响,并利用中效方程计算出中药人参黄芪复方与5-FU单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞的中效浓度(IC50)。2.利用平板克隆实验观察中药人参黄芪复方(3.5mg/ml)与5-FU(0.005mg/ml)单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞克隆形成的影响。3.利用流式细胞技术分析中药人参黄芪复方(35mg/ml)与5-FU(0.05mg/ml)单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞凋亡率(Annexin-FITC/PI双染法)及细胞周期时相(PI单染法)的影响。4.利用划痕试验测定中药人参黄芪复方(35mg/ml)与5-FU(0.05mg/ml)单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞迁移能力的影响。结果1.中药人参黄芪复方可抑制胃癌MGC-803细胞的生长,增殖抑制率随剂量增大而变大。经中效方程计算分析,中药人参黄芪复方与5-FU联用应用对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制具有一定的协同效应,且两药合用的中效浓度(IC50)小于两药单用的中效浓度(IC50)之和。2.平板克隆试验结果显示中药人参黄芪复方(3.5mg/ml)与5-FU(0.005mg/ml)单用及联合应用对人胃癌MGC-803细胞克隆形成均有明显抑制作用,且两药联合应用对克隆形成的抑制作用显著优于两药单用的作用(P<0.05)。3.以Annexin-FITC/PI双染检测细胞凋亡率的结果显示,中药人参黄芪复方(35mg/ml)与5-FU(0.05mg/ml)单用组的凋亡率较空白对照组升高(P<0.05);两药联用组的细胞凋亡率高于两药单用组的凋亡率(P<0.05)。细胞周期的检测结果显示,中药人参黄芪复方(35mg/ml)与5-FU(0.05mg/ml)单用对人胃癌MGC-803细胞均有一定的G0/G1期阻滞作用(P<0.05),两药联用组对G0/G1期的阻滞作用强于两药单用组(P<0.05)。4.划痕试验结果显示中药人参黄芪复方(35mg/ml)与5-FU(0.05mg/ml)单用及联合应用对胃癌MGC-803细胞迁移能力均有明显抑制作用,且两药合用组对迁移能力的抑制作用优于两药单用的作用(P<0.05)。结论本实验所采用的中药人参黄芪复方能抑制胃癌MGC-803细胞的生长作用且具有剂量依赖性,能抑制胃癌MGC-803细胞克隆形成和迁移能力,能诱导胃癌MGC-803细胞凋亡并使细胞周期阻滞于GO/G1期。中药人参黄芪复方与5-FU联合应用对胃癌MGC-803细胞的生长具有协同抑制效应,且两药合用在抑制MGC-803细胞克隆形成和迁移能力、诱导MGC-803细胞凋亡的作用等方面均强于两药单用组。
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