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目的:乳腺癌是一种影响妇女健康的致命性疾病,尽管在基础研究方面取得了巨大的进展,但乳腺癌患者的预后仍旧较差,尤其是伴有转移的患者。据统计,在世界范围内,乳腺癌的发病率和死亡率预计在未来几年将出现显著上升的趋势,尤其是年轻女性乳腺癌的发病率也在逐年提高。目前的证据表明,在45岁以下绝经前年轻的女性中,尤其是患有三阴性乳腺癌的病人预后仍较差,死亡风险较高,这种类型的乳腺癌似乎是高度异质性的,它具有潜在的侵袭性和复杂的生物学特征。脂肪组织在乳腺肿瘤进展中起着重要的调控作用,脂肪组织可为增殖的肿瘤细胞提供营养和脂肪因子。脂肪酸结合蛋白4（Fatty acid-binding protein 4,FABP4）是脂肪酸转运的关键脂肪因子。在代谢性疾病中,血浆中FABP4水平表达明显升高。然而,这种循环蛋白的作用机制目前还不清楚。最近的研究表明,FABP4可能参与了乳腺癌的进展,但其分子机制尚不清楚,所以我们首先在乳腺癌组织及细胞株中检测FABP4的表达情况,结果发现FABP4在浸润性乳腺癌中表达显著上调,并且在有淋巴结转移的标本中要高于未转移者,在高转移性的三阴性MDA-MB-231细胞中表达明显高于其他细胞株,提示高表达的FABP4可能与乳腺癌的转移有关。所以,我们应用小干扰RNA（Small interfering RNA,si RNA）敲低MDA-MB-231细胞中FABP4的表达,并分析下调FABP4对MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,为探索乳腺癌的转移寻找新的治疗靶点提供理论依据。方法:1.应用RT-PCR和Western blot方法检测FABP4在12对乳腺癌组织及配对的癌旁正常组织中的表达,同时检测FABP4在10例未转移性乳腺癌和转移性乳腺癌组织中的表达情况。2.应用RT-PCR和Western blot方法检测FABP4在细胞株（MCF-10A,MDA-MB 231,BT474,ZR-75-30,MCF-7）中的表达情况。3.ELISA试剂盒检测细胞（MCF-10A,MDA-MB231,BT474,ZR-75-30,MCF-7）培养基上清中的FABP4的表达水平。4.设计靶向FABP4的si RNA,转染乳腺癌细胞株（MDA-MB 231）,敲低FABP4的表达。5.应用MTT实验分析下调FABP4的表达对乳腺癌细胞增殖能力的影响。6.应用Transwell实验研究敲低FABP4的表达对乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的影响。7.应用Western blot方法检测敲低FABP4的表达后对EMT相关蛋白的影响。结果:1.FABP4在乳腺癌组织中的表达采用RT-PCR和Western blot实验方法,检测12对新鲜冻存的人乳腺癌组织和癌旁正常组织FABP4的表达情况。结果发现,与癌旁正常组织相比,FABP4在乳腺癌组织中的表达明显升高;同时采用RT-PCR检测FABP4在10例未转移性乳腺癌和10例转移性乳腺癌组织中的表达,结果发现FABP4在转移性乳腺癌组织中的表达明显高于未转移者,具有统计学意义（P<0.05）。2.FABP4在乳腺癌细胞系（MCF-10A,MDA-MB 231,BT474,ZR-75-30,MCF-7）中的表达采用Western blot和RT-PCR的方法检测FABP4在细胞系中的本底表达,结果显示FABP4在乳腺癌细胞系中的表达高于正常乳腺上皮细胞（MCF-10A）,同时在高转移性的MDA-MB-231细胞中表达明显高于其它（BT474,ZR-75-30,MCF-7）三种乳腺癌细胞,较正常组相比,FABP4在MDA-MB-231细胞中蛋白水平升高4倍,RNA水平升高7.8倍,具有统计学意义（P<0.05）。3.FABP4在细胞（MCF-10A,MDA-MB 231,BT474,ZR-75-30,MCF-7）培养基上清中的表达水平。采用ELISA试剂盒检测种乳腺癌细胞培养基上清中的FABP4的表达水平,结果显示与人正常乳腺细胞MCF-10A相比,FABP4在MCF-7中无明显变化,在MDA-MB-231,BT474、ZR-75-30表达增加,但以MDA-MB-231细胞最为显著,是正常乳腺细胞的6.4倍,具有统计学意义（P<0.05）。4.构建si RNA敲低FABP4的表达我们设计靶向FABP4的si RNA来下调MDA-MB-231中的FABP4的表达,转染48小时后收集细胞,采用RT-PCR及Western blot的方法检测敲低效率,结果显示与对照组相比,转染si FABP4组能使MDA-MB-231的FABP4表达下降,敲低效率为78%（P<0.05）。5.敲低FABP4对MDA-MB-231细胞增殖能力的影响在MDA-MB-231中,转染si FABP4,敲低FABP4表达后进行MTT增殖实验,结果显示,与对照组相比,下调FABP4的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞增殖能力,具有统计学意义（P<0.05）。6.敲低FABP4对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的影响Transwell迁移及侵袭实验结果显示,与对照组相比,下调FABP4的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞迁移及侵袭能力,具有统计学意义（P<0.05）。7.采用Western blot方法检测敲低FABP4的表达后对EMT相关蛋白变化的影响。在MDA-MB-231细胞中转染si FABP4,培养48小时后提取蛋白,采用Western blot方法检测敲低FABP4的表达后对EMT相关蛋白的影响,结果显示,与对照组相比,转染si FABP4组E-cadherin表达明显上调,Vimentin、Snail、MMP2、MMP9的表达明显下降。结论:1.FABP4在乳腺癌组织表达明显高于癌旁正常组织,同时在转移性乳腺癌组织中的表达明显高于未转移的乳腺癌组织,同时,FABP4在MDA-MB-231细胞株中的表达明显高于其它三种癌细胞株。2.敲低FABP4的表达后可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力。3.敲低FABP4的表达后能够影响EMT相关蛋白的表达。