【摘 要】
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miRNA是一类在生命活动中发挥重要调控功能的非编码RNA,与各类疾病的发生和发展存在密切关联。因此,开发miRNA的检测和调控工具在基础研究、疾病治疗等应用领域均具有重大意
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miRNA是一类在生命活动中发挥重要调控功能的非编码RNA,与各类疾病的发生和发展存在密切关联。因此,开发miRNA的检测和调控工具在基础研究、疾病治疗等应用领域均具有重大意义。由于miRNA片段短、序列同源性高,现有miRNA的检测和调控工具在成本、效率和可拓展性等方面存在缺陷,限制了其应用。哑铃形环状DNA探针已被报道能够在试管条件下有效结合目标miRNA,具有开发成为新型miRNA检测和调控工具的潜力。本文利用哑铃形DNA探针分子结构稳定、易于制作、扩展性强等特点,研究了基于哑铃形DNA探针的miRNA抑制剂的设计和模块化合成方法;首次开发和报道了基于哑铃形DNA探针和CRISPR-dCas9系统的新型miRNA检测工具;并在分子、细胞水平上研究哑铃形DNA探针作为miRNA抑制剂的潜力。本文对哑铃形DNA探针分子模块化设计与合成的探索性研究可以为哑铃形DNA分子的拓展应用提供思路和借鉴;另一方面,本文建立的新型miRNA检测与干扰技术不仅能为生命科学基础研究提供新的技术手段,而且有望为基于miRNA相关的临床研究提供新的方法和工具。
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