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目的:探讨NOD/SCID(nonobese diabetic/Severe combined immunodeficient)小鼠移植人脐带血(Human Umbilical Cord blood,HUCB)CD34+细胞后免疫重建的特性。建立人脐血NOD/SCID嵌合模型并观察其人源化免疫细胞在小鼠体内的生长分化特性、存活时间及其对HBV感染的清除作用。
方法:
1.NOD/SCID小鼠于Co603.5 Gy照射后24 h内尾静脉输注HUCB CD34+细胞;2.以流式细胞技术鉴定小鼠外周血中CD45+,CD3+,CD19+,CD56+等人源化细胞的比例;
3.NOD/SCID小鼠于移植后第4 wk注射HBV感染者血清并以未移植的NOD/SCID小鼠作为对照,注射同等量的患者血清;
4.于感染后1、7、10、15天采血,免疫荧光定量PCR方法分别检测其HBV-DNA含量。
结果:
1.HUCB CD34+细胞移植后第2 wk,在小鼠外周血中检测出的CD3+CD8+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD19+B细胞、CD3+CD56+NKT细胞的比例分别为18.6%、16.1%、13.1%和27.8%,各细胞比例随小鼠周龄而变化。所有移植小鼠存活时间均达9 wk;
2.移植后小鼠感染HBV血清后,病毒仅在感染后第一天检出,随后消失;未移植CD34+细胞的小鼠外周血HBV-DNA一直维持在103水平;
结论:
1.NOD/SCID小鼠经射线照射后移植HUCB CD34+细胞,在不加任何刺激因子的情况下小鼠可以长时间存活并重建免疫;
2.人脐血NOD/SCID嵌合模型小鼠免疫成功重建后,对HBV感染有快速的清除作用。