分生组织的发育会影响植物的形态建成,而植株形态会极大影响园林植物的群落配置与景观效果。为促进沙柳(Salixpsammophila)的分子定向育种,研究其基因调控机理,本研究利用同源克隆技术克隆获得沙柳SpsLAS2、SpsLAS3基因并做生物信息学及组织特异性表达分析,构建35s::SpsLAS2与35s::SpsLAS3超量表达载体。通过Sitefinding-PCR技术克隆SpsLAS2基因的5’调控区序列片段并做序列分析。具体研究结果如下:1.通过同源克隆技术获得沙柳SpLAS2与SpsLAS3基因的CDS序列,研究发现SpsLAS2和SpsLAS3基因序列相似性达96.69%,氨基酸序列相似性达97.6%。SpsLAS2和SpsLAS3基因ORF长分别为1248、1254 bp,分别编码415和417个氨基酸残基。其氨基酸序列具有 GRS(GIBBERELLIN-INSENSITIVE,REPRESSOR of ga1-3,SCARECROW)基因家族典型的五个结构域[1],属LS亚家族。2.同源蛋白序列比对与系统进化树构建表明,沙柳SpsLAS2、SpsLAS3蛋白序列与欧洲红皮柳亲缘关系最近,其次是毛果杨,而与草本类植物基因差异较大。3.通过对沙柳SpsLAS2、SpsLAS3基因的组织特异性表达结果分析,可知沙柳SpsLAS2基因在叶腋处的表达量最高,然后在韧皮部、成熟叶、茎、根、侧顶芽、顶芽依次降低。沙柳SpsLAS3基因也在叶腋处表达量最高,然后在成熟叶、侧顶芽、顶芽、根、茎、韧皮部依次降低。4.通过酶切产物与35S超量表达载体pMDC32的LR反应构建两基因的超量表达载体,经含Kana的LB培养基筛选、菌落PCR及测序,表明SpsLAS2与SpsLAS3两基因构建超量表达载体成功。5.以沙柳基因组DNA为模板,利用SiteFinding-PCR技术克隆获得了一段长度为501bp的SpsLAS2基因5’调控序列。利用SOGO等在线软件对该序列进行预测与分析发现,该基因5’调控区存在一个可能的启动子,除具有基本的启动子元件CAAT-BOX外,还包含一些典型的光响应元件、激素应答和胁迫诱导相关的顺势作用元件。由此推断SpsLAS2基因的表达可能受光、低温、赤霉素等因素的调控。