伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）是疱疹病毒科（Herpesviridae）α疱疹病毒亚科的成员，可以引起猪、牛、羊及野生动物的伪狂犬病（又称Aujeszky氏病）。猪是该病毒的天然宿主、也是主要的感染源。伪狂犬病给养猪业造成了巨大的经济损失，其危害仅次于猪瘟和口蹄疫。作为主要的诊断抗原，伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E（glycoprotain E，gE）在伪狂犬病根除计划中发挥重要的作用。 为获得大量的、成本较低的诊断抗原，本研究利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达了伪狂犬病病毒gE抗原表位，为国产gE-ELISA试剂盒的研制提供一定的理论依据和借鉴。本研究主要内容： 根据Genebank中伪狂犬病病毒gE基因序列，设计了一对引物，PCR扩增出长度为660bp的gE主要抗原表位基因，将其克隆进酵母分泌表达载体pPICZaC中，成功构建含gE主要抗原表位基因的巴斯德毕赤酵母分泌表达载体pPICZaC-gE。 经过初步诱导筛选，获得了12株能分泌表达PRV gE主要抗原表位基因的重组菌株，表达产物经免疫印迹检测有抗原性。 研究了目的蛋白表达量与各个培养条件的关系，优化后的最佳表达条件为：表达培养液pH值为6.5，诱导时培养液所含菌体浓度为OD₆₀₀值1.5，补加甲醇终浓度为1％，诱导表达时间为72h。在最佳表达条件下所诱导表达的重组蛋白占上清总蛋白56.4％，含量达174.1ug／mL。 所获重组菌株经连续传10代后仍能表达目的蛋白，表明其具有一定的遗传稳定性。 以透析处理过的重组蛋白为包被抗原，对PRV gE阳性和gE阴性血清进行间接ELISA检测，初步结果显示，此目的蛋白区分PRV gE阴性和阳性血清的能力较为有限，有待进一步的研究。