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目的分析与鉴定在胃癌组织和癌旁组织中异常表达的piRNA,探寻其表达规律及其与胃癌患者临床病理因素的相关性,揭示它们在胃癌发生中可能的生物学作用机制,评估其在临床诊断中的潜在价值。方法1.提取胃癌组织和癌旁组织的总RNA,采用piRNA芯片筛选差异表达的piRNA。2.实时定量RT-PCR技术检测胃癌组织中相关piRNA的表达水平,分析其表达水平与胃癌的组织类型、分化程度、肿瘤大小和浸润深度等临床病理因素的相关性。3.设计和合成胃癌相关piRNA的抑制剂和类似物,并用脂质体转染入胃癌细胞中,分别用MTT法、流式细胞术和裸鼠移植瘤模型等方法揭示其与胃癌发生的可能机制。4.回收实验分析外周血中胃癌相关piRNA的水平与循环胃癌细胞数目的关系。5.分析胃癌相关piRNA在外周血中的水平与患者临床病理因素的相关性,测定其诊断的特异性和灵敏性,综合评估胃癌相关piRNA的诊断价值。结果1.采用piRNA芯片发现了胃癌组织与癌旁组织中差异表达的piRNA,进一步经聚类分析筛选出2种胃癌密切相关的piRNA（piR-651和piR-823）。2.发现piR-651和piR-823分别在胃癌组织中高表达和低表达,未发现它们的表达水平与临床病理因素有密切的关系。3.转染piR-651抑制剂和piR-823类似物均有效地抑制了胃癌细胞的增值,前者可阻滞MGC-803胃癌细胞于G2/M期,后者可明显抑制移植瘤的大小和重量。4.外周血中piR-823的水平与胃癌细胞的数量呈线性关系。5. piR-823在外周血中的水平与患者肿瘤的TNM分期和远处转移具有相关性。piR-823作为诊断标记物的灵敏性和特异性均优于目前常用的肿瘤标记物CEA和CA19-9。结论piRNA在胃癌发生的过程中起着重要的作用,通过调控胃癌细胞中有关piRNA的表达能有效地抑制胃癌细胞的生长。piR-823等piRNA有希望成为胃癌诊断的分子标记物。