大鼠腰椎间盘自然退变过程中YAP表达的初步研究

来源 :东南大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:yanlj007
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目的:本实验通过检测不同年龄组SD大鼠腰椎间盘组织中YAP的表达情况,来比较分析不同年龄组大鼠腰椎间盘组织中YAP表达水平的差异,以及YAP表达水平与大鼠腰椎间盘退变程度等级之间的相关性。初步探讨分析YAP在大鼠腰椎间盘自然退变过程中的作用与意义。方法:分别取6周龄、6月龄、12月龄SPF级SD大鼠各10只,将各年龄组的SD大鼠分为组织切片组(6周龄、6月龄、12月龄各5只)和蛋白提取组(6周龄、6月龄、12月龄各5只)。组织切片组大鼠获取其腰4/5、腰5/6节段椎间盘组织,行HE染色观察大鼠腰椎间盘的组织学退变程度,并进行大鼠腰椎间盘退变程度的等级分级评估;用免疫组化染色方法检测大鼠腰椎间盘组织中YAP和磷酸化YAP的表达情况;采用单因素方差分析的统计学分析方法,比较分析三个年龄组之间的YAP和磷酸化YAP表达水平的差异,采用Spearman等级相关分析的方法,比较分析YAP和磷酸化YAP表达水平与大鼠腰椎间盘退变等级之间的相关性。蛋白提取组大鼠分别获取腰4/5、腰5/6节段椎间盘髓核组织,提取组织蛋白,用Western Blot方法检测大鼠髓核组织中YAP和磷酸化YAP的表达情况;采用单因素方差分析的统计分析方法,比较分析三个年龄组之间的YAP和磷酸化YAP表达水平的差异。结果:1.免疫组化染色结果:(1)随着大鼠年龄的增加,YAP在腰椎间盘组织中的表达水平逐渐降低,且不同年龄组之间YAP的表达水平有差异,各年龄组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)随着大鼠年龄的增加,磷酸化YAP在腰椎间盘组织中的表达水平逐渐升高,且不同年龄组之间磷酸化YAP的表达水平有差异,各年龄组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)YAP在大鼠腰椎间盘组织中的表达水平与大鼠腰椎间盘退变等级之间,呈显著负相关性(r=-0.804,P<0.01,呈显著相关)。(4)磷酸化YAP在大鼠腰椎间盘组织中的表达水平与大鼠腰椎间盘退变等级之间,呈显著正相关性(r=0.850,P<0.01,呈显著相关)。2.Western Blot结果:(1)随着大鼠年龄的增加,YAP在髓核组织中的表达水平逐渐降低,且不同年龄组之间YAP的表达水平有差异,各年龄组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)随着大鼠年龄的增加,磷酸化YAP在髓核组织中的表达水平逐渐升高,且不同年龄组之间磷酸化YAP的表达水平有差异,各年龄组之间两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:1.在大鼠腰椎间盘的自然退变过程中,YAP的表达水平逐渐降低。2.YAP的表达水平与大鼠腰椎间盘退变等级之间呈负相关性。3.在大鼠腰椎间盘的自然退变过程中,磷酸化YAP的表达水平逐渐升高。4.磷酸化YAP的表达水平与大鼠腰椎间盘退变等级之间呈正相关性。
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