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目的:建立基于EDAG(红系发育相关基因erythoid develop associated gene)转录活性的新的小分子化合物体外筛选模型,并利用该模型筛选小分子化合物库,期望能快速有效寻找具有抗白血病潜能的先导分子。方法:利用荧光素酶报道基因的实验方法,将EDAG的转录激活活性量化,建立大规模筛选活性小分子化合物的模型,筛选小分子化合物库(约1000个)。利用四氮唑MTS比色法,3H-TdR掺入实验,流式细胞术检测筛选到的活性化合物对高表达内源性EDAG的白血病细胞增殖、凋亡、分化的影响;应用信号转导途径的特异性抑制剂(U0126、CalphostinC、LY294002)检测化合物对EDAG荧光素酶报道基因系统的影响,并用Western blot进一步验证,从而对获得的候选活性化合物的机制进行初步探讨。结果:成功构建了pM-EDAG表达载体,建立了高通量筛选模型,应用该模型筛选获得候选活性化合物2G2和2F10。其中2G2抑制EDAG的转录激活活性,对K562细胞有特异性抑制增殖、促进凋亡作用,但对其分化没有明显影响;2F10增强EDAG的转录激活活性,对K562细胞株有促巨核系分化的作用,没有明显抑制增殖促凋亡作用,MAPK信号转导途径抑制剂U0126对2F10的转录激活效应有特异性抑制作用。结论:本实验成功建立了高通量筛选对EDAG转录活性有影响的活性化合物模型,初步探讨了活性化合物的功能及作用机制。先导化合物经进一步改构后,可能为白血病的治疗提供新的靶点。