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目的:探讨冠心病痰湿证患者舌苔及血清样本中代谢产物的变化,阐释冠心病痰湿证形成的生物学基础。 方法:收集冠心病患者的舌苔及血清样本各60例,其中痰湿证组30例,非痰湿证组30例。另外,采集冠心病痰湿证治疗后的舌苔及血清样本各15例,正常对照组各25例。所有样本经过葵酸(内标)的硅烷化衍生反应,由GC-MS检测后得到的代谢图谱,主要采用主成分分析、层次聚类分析以及偏最小二乘法判别分析,比较痰湿证、非痰湿证组及正常对照组之间的图谱差异性,再利用Metlin数据库得出代谢物质。 结果:(1)冠心病患者与正常人群舌苔及血清中代谢物质存在差异:在舌苔中筛选出6个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为甲基异丁基甲酮,乙酰乙酸甲酯,牛磺酸,丙戊酸,3-吲哚丁酸,D-二磷酸。在血清中筛选出8个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为胆碱,D(-)-β-羟基丁酸,L-丝氨酸,组胺,二甲基乙基醋酸,L-缬氨酸,2-羟基-2-甲基丁酸,异丁酸。(2)冠心病痰湿证与非痰湿证患者舌苔及血清中代谢物质存在差异:在舌苔中筛选出5个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为二甲基乙基醋酸,L-缬氨酸,三甲胺,丙炔酸,氨基丙酮。在血清中筛选出7个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为二乙醇胺,异庚胺,L-异亮氨酸,1-氨基环己基甲酸,丙戊酸,L-赖氨酸,壬二酸。冠心病痰湿证与正常人群舌苔及血清中代谢物质存在差异:在舌苔中筛选出5个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为甲基异丁基甲酮,牛磺酸,L-广亮氨酸,棕榈酸乙酯,绿原酸。在血清中筛选出6个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为D(-)-β-羟基丁酸,L-丝氨酸,甘油酸,组胺,尿嘧啶,二甲基乙基醋酸。(3)冠心病痰湿证患者治疗前后的舌苔及血清中代谢物质存在差异:在舌苔中筛选出5个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为甲基异丁基甲酮,牛磺酸,天冬氨酸,3-甲酚酸,软脂酸乙酯。在血清中筛选出6个显著性差异峰(P<0.05),其代谢产物为D(-)-β-羟基丁酸,L-丝氨酸,组胺,L-脯氨酸,二甲基乙基醋酸,胆碱磷酸。 结论:(1)本课题优化并建立了舌苔GC-MS检测方法,为舌苔的代谢组学研究奠定了基础。(2)基于硅烷化衍生和GC-MS检测,分析冠心病患者(痰湿证+非痰湿证组)与正常人群的舌苔及血清样本,在舌苔中有6个差异性峰(P<0.05),在血清中有8个差异性峰(P<0.05)。筛选这些差异性峰,再鉴定相应差异性代谢产物,可为临床早期诊断和防治冠心病提供一定的现代生物学依据。(3)基于硅烷化衍生和GC-MS检测,分析冠心病痰湿证与非痰湿证患者的舌苔及血清样本,在舌苔中有5个差异性峰(P<0.05),代谢产物为二甲基乙基醋酸,L-缬氨酸,三甲胺,丙炔酸,氨基丙酮。在血清中有7个差异性峰(P<0.05),代谢产物为二乙醇胺,异庚胺,L-异亮氨酸,1-氨基环己基甲酸,丙戊酸,L-赖氨酸,壬二酸。这些差异性代谢产物,为冠心病的中医辨证分型提供了一定的客观理论依据。(4)基于硅烷化衍生和GC-MS检测,分析冠心病痰湿证与正常人群、痰湿证治疗前后舌苔及血清样本,舌苔中重复的差异性代谢产物有2个,血清中重复的差异性代谢产物有4个。筛选这些差异性代谢产物,对揭示痰湿证在分子水平上的实质意义具有重大价值,并为冠心病的临床疗效评价及对其进一步微观辨证提供了新的研究思路与方法。