儿茶酚胺终末代谢物与辣椒素的电化学检测方法建立及应用

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目的:1.建立一种简便、快速的香草扁桃酸(Vanillylmandelic acid,VMA)和高香草酸(Homovanillic acid,HVA)同时检测的电化学方法。2.建立一种快速、简便、低成本、高灵敏的电化学方法检测辣椒粉中的辣椒素。方法:1.基于免修饰丝网印刷碳电极(screen-printed carbon electrodes,SPCEs),采用循环伏安法(Cyclic voltammetry,CV)对VMA和HVA的电化学行为进行研究;采用示差脉冲伏安法(Differential pulse voltammetry,DPV)对VMA和HVA进行定量检测。由于HVA的氧化峰电位与VMA的氧化峰I电位相似,并且可以与VMA的氧化峰II分开,因此,VMA以氧化峰II进行定量,HVA则通过VMA和HVA混合标准品溶液的氧化峰I总电流减去VMA的氧化峰I电流进行定量。2.采用示差脉冲-吸附溶出伏安法(Differential pulse adsorptive stripping voltammetry,DP-Ad SV)对辣椒素类物质进行定量测定;采用直接稀释法减少或消除辣椒粉样本的基质效应。所用电极为免修饰SPCE。结果:1.在最佳实验条件下,VMA的校准曲线线性范围为2.52~100.9μmol L-1,氧化峰II的线性方程:I=0.1125 c-0.0361(R~2=0.9992);HVA的线性范围为2.74~109.8μmol L-1,线性方程:I=0.1576 c+0.1266(R~2=0.9982)。VMA和HVA的检测限(Limit of detection,LOD)分别为0.13μmol L-1和0.21μmol L-1(S/N=3)。VMA和HVA的定量限(Limit of quantification,LOQ)分别为0.21μmol L-1和0.34μmol L-1。同时,HVA的氧化峰电流在加入VMA前后保持稳定,相关性良好(r=0.9999),表明HVA的定量准确性不受VMA的影响。此外,该法表现出优异的重现性和准确性。VMA的日内和日间变异系数分别小于1.20%和2.54%,HVA的日内和日间变异系数分别小于1.61%和3.67%。高、中、低浓度VMA和HVA的回收率分别为94.4%~113.6%和84.8%~113.1%。2.在最佳实验条件下,辣椒粉中辣椒素检测的线性范围为0.0300~2.50μg m L-1(0.360~30.0 g kg-1),线性方程为:y=2.613 x-0.002,R~2=0.9986,LOD为0.013μg m L-1(S/N=3),LOQ为0.025μg m L-1。辣椒素的日内和日间变异系数分别低于6.49%和7.79%,回收率为95.0%~105.0%,表明该法具有良好的精密度与准确度。将该方法应用于辣椒粉中辣椒素的检测,并与色谱-荧光检测法测得含量进行比较,结果基本一致。结论:1.利用VMA和HVA的氧化机理不同,基于免修饰SPCE,建立了一种简便、快速的VMA和HVA同时检测的电化学方法,可实现两种物质的同时检测。该法具有简便、快速的特点,为常规临床或实验室研究进行VMA和HVA的同时检测提供了一种新方法。2.基于免修饰SPCE建立了一种快速、简便、低成本、高灵敏的电化学方法,可用于辣椒粉中辣椒素类物质的检测。该法有望为食品行业辣椒制品中辣椒素的检测提供一种新方法。
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