儿茶酚胺代谢物电化学发光研究

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电化学发光(electrochemiluminescence),又称电致化学发光(electrogeneratedchemiluminescence),简称ECL,是指通过施加一定的电压进行电化学反应,在电极表面产生一些电生物质,然后这些电生物质之间或电生物质与体系中某些组分之间通过电子传递形成激发态,由激发态返回基态而产生的一种发光现象。三联吡啶钌(Ru(bpy)32+)电化学发光由于具有适用范围广、发光效率高、试剂稳定和电化学可逆等诸多优点而被广泛应用于生物分析、临床分析、环境分析和食品分析等领域。本论文在设计制作一种电化学发光检测池的基础上,成功建立了儿茶酚胺代谢产物的电化学发光分析方法。主要内容如下:1.设计制作了一种电化学发光检测池。该检测池构造简单、制作方便、通用性强,适用于各种常规电极(如金电极、铂电极、玻碳电极等);工作电极位置固定且容易取出,有利于检测池和电极的清洗,同时可提高实验结果的重现性;贮液池体积小,有利于减少药品的用量,降低实验成本,扩大应用范围。2.首次研究了在水溶液中利用儿茶酚胺代谢产物(高香草酸和香草扁桃酸)作为Ru(bpy)32+电化学发光的共反应试剂。激发态Ru(bpy)32+的形成被证实是由于Ru(bpy)33+与高香草酸和香草扁桃酸被氧化后形成的自由基中间体发生反应所产生。同时,我们发现当高香草酸和香草扁桃酸的浓度处于相对较高的水平时,发光强度明显地被猝灭。因此,在该研究中我们提出了Ru(bpy)32+/HVA和Ru(bpy)32+/VMA体系的自猝灭电化学发光反应过程。3.建立了一种Ru(bpy)32+电化学发光对高香草酸和香草扁桃酸进行分析的新方法。基于NaIO4对-羟基酸的氧化去羧基,成功抑制了香草扁桃酸的发光强度,从而区分了这两种化学结构相似的化合物。高香草酸和香草扁桃酸的线性范围为8.010-71.010-10mol/L,检测限(S/N=3)为8.010-11mol/L。结果表明该方法对高香草酸和香草扁桃酸的测定具有较高的灵敏度和选择性。
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