油菜菌核病菌致病性分化及其与胞壁降解酶活性关系的研究

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油菜菌核病是一种世界性的油菜病害,在世界油菜生产国和地区均有分布。在我国也有发生,位于油菜三大病害之首,尤其以长江流域和东南沿海地区最为普遍和严重,严重影响了油菜产量和品质。本论文以采集于安徽不同市县的24株油菜菌核病菌株为供试菌株,以甘蓝型油菜陕油8号和沪油15号为供试油菜品种,采用牙签菌丝体接种法测定油菜菌核病的致病性。通过比较发病时病斑长度来评价不同菌系的致病能力。采用DNS(3,5-二硝基水杨酸)法测定上述24株菌株的胞壁降解酶纤维素酶和果胶酶活力,考察致病性与纤维素酶和果胶酶是否具有相关性。主要结果如下:1不同地区的油菜菌核病致病性分化研究从安徽省桐城、无为、宁国、旌德、寿县等5个市县采集菌核,分离鉴定并选取其中的24株菌株作为供试菌株,在供试油菜5、6叶期,采用牙签菌丝体接种法接种测定菌株对感、抗两品种油菜的致病力。实验表明,来源于各个地区的菌株具有明显的致病性,所有接种油菜植株均发病,症状明显。各菌株间的致病力有明显的差异,存在着明显分化,这种致病性差异与菌株的地理来源有很大的联系,但相不完全相关,任何一个地区都有致病性强和弱的菌株。2油菜菌核病纤维素酶活性与致病力的关系采用DNS法测定供试菌株的纤维素酶活性。纤维素酶分解组织得到低分子还原糖。还原糖与显色剂DNS在碱性条件下反应得到红棕色的络合物。在一定的浓度下,吸光度与糖浓度呈现正相关,据此可以测得致病酶的含量。结果显示:油菜菌核病菌不同菌株的纤维素酶活有较大差异,且酶活值大小与菌株致病力强弱密切相关。将菌株接种所致的病斑长度(y)与纤维素酶活值(x)两因子进行了相关分析,结果表明,供试菌株纤维素酶活性与菌株所致病斑长度之间的相关性显著,菌株的纤维素酶活性越高,其致病力也越强。供试菌株接种陕油8号品种油菜24h后,纤维素酶活与致病力的相关系数为0.9060,y=13.208x-1.6134;接种48h后所致病力与纤维素酶活的相关系数为0.9444,y=25.944x-3.2497。供试菌株接种沪油15号品种油菜24h后,纤维素酶活与致病力的相关系数为0.5046,y=9.106x-0.8319;接种48h后致病力与纤维素酶活的相关系数为0.5545,y=26.887x-2.8857。3油菜菌核病果胶酶活性与致病力的关系采用DNS法测供试菌株果胶酶活性,测定方法及原理与测定纤维素酶相似。测得的结果表明:油菜菌核病病原菌会产生大量的果胶酶,油菜菌核病的致病性果胶酶存在一定的相关性。对菌株接种所致的病斑长度(y)与果胶酶活值(x)两因子进行了相关分析,结果表明油菜菌核病致病性与果胶酶活性也呈正相关,呈线性递增趋势。在陕油8号油菜品种上,供试菌株接种24h后,致病力与果胶酶酶活相关系数为0.5927,y=0.0615x-0.2135;接种48h后,致病力与相应果胶酶活值相关系数为0.5496,y=26.887-2.8857。在抗病性较强的沪油15号油菜品种上,供试菌株接种24h后,致病力与酶活值的相关系数为0.7130,y=0.2266-2.6439;接种48h后,致病力与相应果胶酶活值相关系数为0.6596,y=0.0847x-0.922。
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