对豌豆根瘤菌可诱导的结瘤基因操纵子nodO,nodMNT,nodFFL,nodABCIJ上游调控区域的研究

来源 :中国科学院上海生物化学研究所 中国科学院上海生物化学和细胞生物学研究所 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ccicc
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在豌豆根瘤菌(Rhizobium leguminosarum bv.viciae)的共生质粒(pRLlJI)上有13个结瘤基因,分属5个操纵子(nodO,nodMNT,nodFEL,nodD和nodABCIJ).其中nodD是调控基因,受到自身反馈调控(negative autorgulation),其它四个操纵子均受到调控蛋白NodD的诱导激活调控.该论文以nodFEL操纵子的上游调控区域作为研究对象,经过一系列的体内体外实验,发现:与nodD和nodABC间的调控区域的情况类似,在nodFEL的上游调控区域也存在两个转录方向相反的启动子,它们中的一个负责已知的nodFEL操纵子的转录,另一个则负责转录一个新的基因,命名为px<,2>.Northern blot assay表明px<,2>的转录本长度为0.72kb;对该区域内进行蛋白搜索,发现一个,也是唯一的蛋白开放阅读框(ORF),编码66个氨基酸的小蛋白,可能为px<,2>的编码蛋白.进而在对px<,2>功能的研究中发现,当px<,2>在根瘤菌体内的拷贝数被提高后,能特异上调其相邻基因nodF的体内被激活后转录水平;而当引入突变的px<,2>,观察到的上调效应消失,证明nodF激活后转录水平的增加是px<,2>导致的.又因为该突变破坏了编码66个氨基酸的蛋白开放阅读框,所以该移码突变支持了"px<,2>是以蛋白的形式发挥功能"这一推测.进一步对px<,2>自身的调控也进行了研究.
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